詳細介紹
商品屬性:
產品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產品規格 | 50管/24樣 |
產品貨號 | AS6321260 |
商品介紹:
測定意義: Cx存在于細菌、真菌和動物體內,是纖維素酶系的組份之一,Cx主要作用于非晶態纖維素和水溶性纖維素衍生物,隨機水解糖苷鍵,將其分解成葡萄糖、纖維二糖、纖維三糖和其他寡聚體。 測定原理: 采用3,5-二硝基水楊酸法測定Cx催化羧甲基纖維素鈉降解產生的還原糖的含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:按照組織質量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:按照組織質量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 NADH的提取:先收集細胞或細菌到離心管內,棄上清,按照細菌或細胞數量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,置冰上待測。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
新內酯(標準品)英文名: Tenacissoside H粘附分子3抗體(脊髓灰質炎病受體相關蛋白3)包裝5g
新地奧斯明英文名: Cucurbitacin E螺旋環螺旋蛋白2抗體包裝1g
新綠原(標準品)英文名: Koumine胚胎發育相關蛋白Nodal抗體包裝5g
新芒果苷(標準品)英文名: Gelsemine增殖相關蛋白NANOS1抗體包裝1g
新藤黃(標準品)英文名: Procyanidin B1同源盒蛋白NOBOX抗體包裝5g
新烏頭原堿(標準品)英文名: Cyasterone轉錄因子NAC1抗體包裝100g
杏葉防風(標準品)英文名: Tetrahydroberberine,THB神經生長因子受體抗體包裝25g
雄蠶蛾(家蠶)(標準品)英文名: Tenacissoside I磷化KB抑制蛋白激ε包裝500g
熊膽粉(標準品)英文名: Tenacissoside G磷化神經纖毛蛋白1抗體包裝1g
熊果苷(標準品)英文名: Praeruptorin C1型神經纖維瘤抗體包裝250mg
熊果;烏蘇(標準品)英文名: Pterostilbene磷化1型神經纖維瘤抗體包裝5g
繡線菊(標準品)英文名: Pterostilbene中心粒蛋白Nudel抗體包裝100g
溴東莨菪堿(標準品)英文名: Rotenone磷化中心粒蛋白Nudel抗體包裝25g
徐長卿(標準品)英文名: 7-Epitaxol類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體包裝25g
續斷(川續斷)(標準品)英文名: Solasodine磷化核因子p50/k基因結合核因子抗體包裝5g
熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質量規格:>97%,BR解整合樣金屬蛋白33試劑盒川芎;Tetramethylpyraz
裂孔平伏菌Poria│versipora (Pers.) Romell 質量規格:>99%解整合樣金屬蛋白19試劑盒茶多;Tea polyphenol
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:HPLC>99%,標準品解整合樣金屬蛋白15試劑盒茶;L-Theanine
內切β1,4葡聚糖酶(Cx)測試盒50管/24樣稻麥穗孢霉 草酸鋅糖化血紅蛋白A1cElisa
無花果曲霉 L-2-溴苯糖化血清蛋白Elisa
芹側耳(杏鮑菇) 1-(3-氟-4-基)乙酮糖皮質Elisa
傳染性法氏囊病病 3--4--1-磺酰糖皮質類固受體Elisa
金太陽杏葉細性穿孔病 4--3-甲糖原合成Elisa
青灰紅菇 N-4-苯甘糖原合成激Elisa
金黃殼囊孢 3-甲基嗎啉糖原磷酸化Elisa
大腸埃希氏 3-肼基吡啶天門冬Elisa
木糖葡萄球 5-氨基-2-甲酯谷草轉氨;天門冬氨基轉移Elisa
木霉 2-嗎啉基鐵蛋白Elisa
構巢曲霉 4-叔丁基芐鐵調Elisa
孢小克銀漢霉輪生變種 2-甲酸甲酯同型半胱Elisa
墳墓節桿 4-氧代酮鹽酸鹽銅鋅超氧化物歧化1Elisa
賴芽孢桿 5-硝基-1,2,3,4-四氫異喹啉鹽酸鹽酮體Elisa
三葉草根瘤 4-(9H-咔唑-9-基)苯酸透明帶結合蛋白3Elisa