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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類：細(xì)胞其他
儲(chǔ)存條件：4℃,12個(gè)月
用途：又稱KREBS-RINGER BICARBONATE BUFFER。不含碳酸氫鈉。作用類似于Ringer液，用于動(dòng)物離體實(shí)驗(yàn),肌體灌流、清洗組織，并維持離體組織的正常生理功能。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Krebs-Ringer粉劑 | 1L | FS-R6604 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
5-羥色鹽鹽（標(biāo)準(zhǔn)品） Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g
6'''-阿魏酰斯皮諾 Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg
6''-O-二酰基染料木苷 Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g
6''-二沙苑子苷單酯 Cellulase磷化雌激受體ER alpha 抗體包裝5g
6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷 Chondroitin sulfate重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml
6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷 Isonicotinic acid雌激受體α抗體（用于western blot）包裝5ml
6,7,4'-三羥基異黃 L-Malic acid雌激受體α/β抗體包裝25g
6-氧基二氫血根堿 Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體包裝5g
6-氧基山柰-3-O-蕓香糖苷 Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml
6-姜(姜辣) Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g
6-姜烯（標(biāo)準(zhǔn)品） D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g
6-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g
6-基異麥冬黃烷A(標(biāo)準(zhǔn)品) Hemoglobin磷化雌激受體α抗體包裝1g
7,4'-二羥基黃（標(biāo)準(zhǔn)品） PEG 10000磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g
7,8-二氫生物蝶呤 DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g
JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品髓性核分化抗原試劑盒肉豆蔻;Myristicin
瓦克青霉Penicillium│waksmanii 質(zhì)量規(guī)格：純度大于99%,R構(gòu)型髓系觸發(fā)受體-1試劑盒忍冬苷;Lonicerin
ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC資源名稱: 低溫乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體試劑盒日蟾蜍他靈;Gamabufotalin
Krebs-Ringer粉劑SPHK2/FITC 熒光標(biāo)記鞘氨激2IgG
Spindlin 1/SPIN-2/FITC 熒光標(biāo)記Spindlin 1/SPIN-2 腫瘤形成相關(guān)因IgG
SPY /FITC 熒光標(biāo)記抗spindlyIgG
SRC /FITC 熒光標(biāo)記整合樣金屬蛋白與凝血1型-7IgG
phospho-Src (Tyr418)/FITC 熒光標(biāo)記化Src原癌因IgG
SREBP-1/FITC 熒光標(biāo)記膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1IgG
SREBP-2/FITC 熒光標(biāo)記膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2IgG
SRF/FITC 熒光標(biāo)記血清應(yīng)答因子IgG
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