詳細介紹
產品分類:固定液
儲存條件:室溫,12個月
用途:復合固定液,含80%乙醇和10%甲醛,既有脫水作用,也有交聯作用
注意事項:屬于脫水-交聯固定劑,甲醛、乙酸溶于95%的乙醇即成。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液 | 500ml | FS-R6816 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。
(標準品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole微小染色體維持缺陷蛋白7抗體包裝25g
龍血A(標準品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazoleE3泛連接MUL1抗體包裝5g
龍芽楤木(標準品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole纖微絲相關糖蛋白2抗體包裝5g
龍眼肉(標準品) 3-Quinuclidinone HCl肥大類糜蛋白1抗體包裝5MG
漏蘆(祁州漏蘆)(標準品) Irsogladine硝唑單克抗體包裝100g
蘆丁/蕓香葉苷(標準品) ADA monosodium salt線粒體核糖體蛋白L12抗體包裝25g
蘆根(標準品) ADA disodium salt線粒體核糖體蛋白L39包裝1g
蘆薈(好望角蘆薈)(標準品) ADA脫氫激1抗體包裝250mg
蘆薈大黃(標準品) (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine絲裂原活化的蛋白激p38β抗體包裝5g
蘆薈苷(標準品) Prednisolone phosphate sodium核基質蛋白3抗體包裝1g
蘆薈苷B(標準品) DMT-CL組織相容性復合體蛋白1抗體包裝5g
蘆薈新甙D(標準品) N-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon組織相容性復合體蛋白2抗體包裝1g
蘆筍(標準品) 6-Chloroguanosine轉化因子樣蛋白4抗體包裝250mg
蘆竹根(標準品) ITP•Na3NADH復合體5抗體包裝5g
蘆竹堿(標準品) GTP.Na2肌微管1抗體包裝1g
: AS3.4357資源名稱: 納地青霉 質量規格:>99%,BR抗磷脂酰抗體試劑盒沒食子兒茶;Gallocatechin
阿魏側耳Pleurotus│fuscus var. ferulae Lanzi 質量規格:>98%,BR,可用于培養抗磷脂酰抗體試劑盒二乙烯苷;tetrahydroxyl
柄孢殼菌Podospora│cochleariformis 質量規格:>98%,BR抗磷壁抗體試劑盒二氫麻醉椒苫 ;dihydrometh
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液IGF-BP3 人胰島su樣生長因子BP3規格: 48T
Human Urotensin II 人尾加壓suII規格: 48T
TSLP(human) 人胸腺基質淋巴細胞生成su規格: 48T
PLGH 人胎盤生長su規格: 48T
FN 人纖維連結蛋白規格: 48T