詳細介紹
公司產品僅供科研使用:
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
微量法 | 100管/96樣 | AS6321376 |
商品介紹:
商品介紹 測定意義: 丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase,PC,EC 6.4.1.1)廣泛存在于動物、霉菌和酵母的線粒體中,催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,是糖異生過程的第一個限速酶,在保證血糖的動態平衡方面起著重要的作用。 測定原理: PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi,蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm下測定NADH氧化速率,即可反映PC活性 需自備的儀器和用品: 分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測。
2、細菌、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次)8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
產品優點如下:
1、快速簡便:雙試劑,直接操作,快速、簡便。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,鄰苯三酚法的200倍
4、穩定性好:批內CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.2%。6、回收試驗: X =102.3%。7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。且特異性強,不受類SOD物質的干擾8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
平菇胰輔脂抗體Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰還原(HMG-CoAR)免疫試劑盒
螺卷毛殼19號染色體開放閱讀框45抗體Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit人羥甲基戊二單酰(HMG-CoA)免疫試劑盒
鮮綠青霉過氧化氫誘導轉錄蛋白1抗體Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit人羥基賴正己(HLNL)免疫試劑盒
釀酒酵母核因子NFκB激活蛋白1抗體Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit人羥脯(Hyp)免疫試劑盒
米曲霉第12號染色體開放閱讀框23抗體Human GSK3α(Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha) ELISA Kit人強啡肽(Dyn)免疫試劑盒
釀酒酵母γ-連環/連接蛋白γ抗體Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit人潛伏轉化生長因子β結合蛋白2(LTBP2)免疫試劑盒
日勾維腸桿菌10號染色體開放閱讀框4抗體Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit人潛伏膜蛋白1(LMP-1)免疫試劑盒
中國克魯維酵母10號染色體開放閱讀框47抗體Human GPI(Glucose 6 Phosphate Isomerase) ELISA Kit人前心鈉肽(Pro-ANP)免疫試劑盒
黃色短桿菌10號染色體開放閱讀框81抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前纖維蛋白1抗體免疫試劑盒
猴頭菌19號染色體開放閱讀框47抗體Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人前纖維蛋白1免疫試劑盒
金黃殼囊孢19號染色體開放閱讀框54抗體Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人前鐵調(Pro-Hepc)免疫試劑盒
貝雷絲孢酵母N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖轉移1抗體Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人前列腺性磷(PAP)免疫試劑盒
球孢白僵菌19號染色體開放閱讀框18抗體Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人前列腺H2(PGH2)免疫試劑盒
總狀毛霉19號染色體開放閱讀框21抗體Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人前列腺F2α(PGF2α)免疫試劑盒
沼澤紅假單胞菌19號染色體開放閱讀框24抗體Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人前列腺F(PGF)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit人前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
葡萄穗霉屬Stachybotrys│sp. 質量規格:>98%,BRB連接蛋白試劑盒橙花
大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:>98%,BRB活化因子受體試劑盒長梗秦艽
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質量規格:>98%,BRB活化因子試劑盒常山乙
丙酮酸羧化酶(PC)測試盒100管/96樣史氏芽孢桿 2,5-二苯肼鹽酸鹽磷酸化鈣調依賴性蛋白激2Elisa
Erwinia persicina 2-溴苯肼鹽酸鹽紅生成受體Elisa
頭狀莖點霉 5-氨基-2-甲輕脂酞輔脫氫Elisa
金針菇 Dichlorobis(2-(二苯基膦)乙)釕(II)ATP合成Elisa
頂黑毛殼 4-溴-2,3-二甲核因子κB抑制物激Elisa
出芽短梗霉(黑酵母) 花生酸舒緩激肽Elisa
大豆慢生根瘤 花生酸痢疾密螺旋體Elisa
釀酒酵母 2,凝血原Elisa
檸檬兩面神 5-氟-2-缺氧誘導因子Elisa
米根霉 高哌唾液淀粉α1Elisa
枯草芽孢桿 10-溴癸酸IIA分泌型磷脂A2Elisa
健康皮張抗原(兔皮A) 2,4,6-三氟異酸苯酯煙酰腺二核苷酸Elisa
鎖擲酵母 3-氟-4-(甲氧基羰基)苯酸20-羥化二十碳四烯酸Elisa
釀酒酵母 2-溴-5-(三氟甲基)吡啶糖原合成激3Elisa
陰溝腸桿 4-氨基肉桂酸乙酯巨噬來源的趨化因子22Elisa
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。