詳細介紹
參數規格:
產品名稱:ATTO 565琥珀酰亞胺酯
貨號:FSP234
產品規格:1mg/5mg/100mg
分類:熒光核酸試劑
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產品特點:
產品僅用于科研本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環數的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
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ATTO 565琥珀酰亞胺酯Pseudomonas│plecoglossicida分離基物: 土壤斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 可以在含3000mg/l的甲磺隆的無機鹽培養基中生長培養基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;定期移植法
Tatumella│sp.分離基物: 大溪地諾尼果凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: CM0217生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Pseudomonas│sp.凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0033生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法;定期移植法
Nocardia│sp.凍干物模式菌株: yes培養基: 38生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Exiguobacterium│profundum分離基物: 沉積物/珊瑚砂顆粒斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 1.生物降解;2.生物催化;3.生物活性物質篩選; 4.海洋微生物生態學研究。培養基: 821生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│sydowii (Bainier & Sartory) Thom & Church分離基物: 樹皮表面斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 14生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
Enterococcus│faecalis凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 6生長條件: 36℃存儲條件: 定期移植法
瓊氏不動桿菌種屬: AcinetobacterjuniiBouvetandGrimont安全等級: 1模式菌株: no培養基: 2生長條件: 37℃
Bacillus│licheniformis斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 堿性蛋白酶。培養基: CM0002生長條件: 30℃存儲條件: 定期移植法;其他
操作程序:
產品僅用于科研由您提供該實驗中目的基因的相關資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務的可能性和技術路線;
商定服務收費、付款方式、服務期限等,并簽定技術服務合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉錄、Real-time PCR擴增、數據分析。
提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關分析數據等。