詳細介紹
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
硫堇染色液 | 50ml | FS-R7146 |
產品分類:染色其他
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:主要用于染色體染色如體細胞染色體和減數分裂染色。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩定可靠。
釀酒酵母熱休克蛋白J2抗體Human AHR(Aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit人β4整合(ITG β4/CD104)免疫試劑盒
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地中海中慢生根瘤菌*二酰基甘油激5抗體Human RD3 (Protein RD3) ELISA KIT人β2整合(ITG β2/CD11+CD18)免疫試劑盒
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青黃褐硬皮馬勃雙同源框蛋白4抗體Human RCCD1 (RCC1 domain-containing protein 1) ELISA KIT人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)免疫試劑盒
釀酒酵母無精癥缺失基因1抗體Human RASAL1 (RasGAP-activating-like protein 1) ELISA KIT人β2糖蛋白(β2-GP)免疫試劑盒
膠孢磷化周期檢測點激2抗體Human ANKRD19P (Putative ankyrin repeat domain-containing protein 19) ELISA KIT人β1腎上腺能受體(β1AR)抗體免疫試劑盒
多主葡萄殼菌通道蛋白DRK1抗體Human RCSD1 (CapZ-interacting protein) ELISA KIT人β1,4-N-乙酰基半乳糖轉移2(B4GALNT2)免疫試劑盒
蜜蜂生球擬酵母GTP發育調控結合蛋白1抗體Human RCE1 (CAAX prenyl protease 2) ELISA KIT人β,β胡蘿卜9',10'加氧(BCO2)免疫試劑盒
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平滑假絲酵母DAP凋亡誘導蛋白激2抗體Human REPS1 (RalBP1-associated Eps domain-containing protein 1) ELISA KIT人α戊二脫氫(α-KGDHC)免疫試劑盒
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黃赭色鏈霉菌命運決定因子DACH1抗體Human RBCK1 (RanBP-type and C3HC4-type zinc finger-containing protein 1) ELISA KIT人α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒
米根霉Dab2相互作用蛋白抗體Human RSC1A1 (Regulatory solute carrier protein family 1 member 1) ELISA KIT人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)免疫試劑盒
食砜節桿菌線粒體2,4-雙烯酰還原1抗體Human RAP1GAP2 (Rap1 GTPase-activating protein 2) ELISA KIT人α-內肽(α-EP)免疫試劑盒
大腸桿菌動力蛋白激活蛋白亞基3抗體Human RXFP2 (Relaxin receptor 2) ELISA KIT人α肌動蛋白(α Actin)免疫試劑盒
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質量規格:100µg/mL,基體: 1%HCl芹菜苷
鏈霉菌(吸類群)Streptomyces│sp. 質量規格:濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標準品7-乙基-10羥基
球形芽孢桿菌Bacillus│sphaericus 質量規格:1000μg/ml葒草-2"-0-B-L半乳糖苷
硫堇染色液pFN(Human Plasma fibronectin) ELISA kit 人血漿纖維連接蛋白規格: 48T
cFn(Human cellular fibronectin) ELISA kit 人細胞纖維連接蛋白規格: 48T
TPS(Human Total protein S) ELISA Kit 人總蛋白S規格: 48T
SDPR(human serum deprivation response) ELISA Kit 人血清剝奪反應相關蛋白規格: 48T
HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3) ELISA Kit 人中性粒細胞防御su1-3規格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩轉株的工作濃度需要根據細胞類型,培養基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養板上,37℃,CO2培養過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養板,繼續用含藥物的篩選培養液維持培養7天。
5) 之后更換正常培養基培養即可。