六胺銀法染色實驗服務
實驗原理:
利用氧化劑氧化細菌和真菌內的細胞壁內的粘多糖等成分而暴露出醛基酸基還原六胺銀內的銀離子為黑色的金屬銀而顯色。同理,腎小球基膜內含有一些多糖成分, 易于被氧化露出醃基而被染色。
六胺銀法實驗步驟:
1、切片經二 甲苯5min*2,無水乙醇5min*2、 95%乙醇6min*2、 85%乙醇5min、 70%乙醇5min完成脫蠟。脫蠟后自來水洗5min。
2、加入1%過碘酸水溶液中作用10min>自來水洗,然后蒸憶水洗二次,每次3min。
3、六氣銀液預熱至65t,切片放入其中浸染75min蒸餡水洗二次,每次3min。
4、用0.1%氯化金調色處理5min蒸憶水洗二次,每次3min。
5、用5%硫代酸鈉處理5min蒸惘水洗二次,每次3min。
6、用0.5%亮綠復 染細胞質。
7、切片再經70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇各Imin:經95%Z醇imin.換液重復-次;無水乙醇2min,換液重復一次快速脫水,后用二甲苯透明5min,換液重復一次。
8、根據蓋玻片規格和載玻片上組織多少,滴加適量中性樹膠,封片。
操作要求:
1、氧化切片很重要。氧化液種類和濃度、作用時間影響陽性結果的數量。
2、使用的容器應保持清潔,才能保證結果的穩定性。
結果判定:
細菌、真菌的粘多糖成分被染成深黑色,腎小球基膜也被染成深黑色,背景為淡綠色或無色。
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