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 程：      

 大腸桿菌O157:H7的測(cè)試片檢測(cè)方法

方法編號(hào)：5043

1 適用范圍：用于各類(lèi)食品以及人體體檢樣品中大腸桿菌O157:H7的檢測(cè)。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測(cè)需要。

2 方法原理：采用選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料，加入專(zhuān)一性酶顯色劑，運(yùn)用微生物測(cè)試片技術(shù)，做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品，通過(guò)接種、培養(yǎng)，如果樣品中含有大腸桿菌O157:H7，即可在紙片上呈現(xiàn)紫紅色的菌落。

3 操作方法

3．1 樣品處理：無(wú)菌操作取25g（mL）樣品放入含有225mL無(wú)菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)，充分振搖或置均質(zhì)器中制成樣品勻液，靜置片刻。

3．2接種：將測(cè)試片水平放在臺(tái)面上，小心揭開(kāi)上蓋膜，用滅菌吸管吸取1 mL樣品上清液或增菌液，均勻加到中央的濾紙片上，然后輕輕將上蓋膜放下，靜置5min。每個(gè)樣品接種兩片。

3．3培養(yǎng)：將加了樣的測(cè)試片疊放在一起，放入原來(lái)的自封袋中，堆疊片數(shù)不超過(guò)12片，透明膜向上平放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)15h～24h。

3．4結(jié)果觀察：對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察，呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157:H7；呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。

4附加說(shuō)明

4．1 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測(cè)，用取樣棉簽涂抹被測(cè)物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測(cè)試片上。

4．2注意使用過(guò)的紙片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。

4．3出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本，用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證，沒(méi)有條件的話至少再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。