細胞培養板如何選?考慮哪些因素?
市場上的細胞培養板有不少,如何選擇合適的呢?建議從以下方面考慮:
1. 孔的數量
大多數用戶在組織培養瓶上開始組織培養。不過,許多應用也需要多孔板。理想的數量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機器人的協助。*手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機器人的幫助當然更好。擴展到384孔板,就更加需要機器人,而1536孔板更是需要。當然,高密度多孔板的挑戰還在于分析小型化。
2. 孔的形狀
孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細胞類型和下游應用。對于傳統的2D細胞培養(如HeLa或MDCK細胞),特別是需要對培養物進行成像或分光光度測定,通常選平底(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的細胞,弧形底(C-bottom)也不錯。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(如球體細胞培養),因為圓的表面讓細胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細胞培養實驗,但在細胞沉淀時可能有用。
3. 微孔板的顏色
多孔板的顏色也與應用息息相關。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數的儀器時,底部應該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數的儀器時,應選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應用通常使用黑色表面,以吸收激發信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串擾。
4. 表面處理
選擇哪種細胞表面處理,這要取決于你培養的是懸浮細胞還是貼壁細胞。對于懸浮或球體細胞培養,建議使用有疏水凝膠處理的微孔板,可抑制細胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細胞(如HeLa),標準的組織培養表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細胞(如原代細胞),或涉及到嚴格洗滌的應用,建議使用不需要冷藏的微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質的物理變化。
后,當然不能忽視培養容器的質量。這不僅僅指微孔板,還包括與細胞接觸的一切,比如吸頭,以避免細胞污染或死亡。