詳細介紹
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
TRAIL,小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體酶聯免疫試劑盒實驗標本采集必修課:
1)標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2)血清:使用不含熱原的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
3)血漿:3000轉離心30分鐘取上清。
4)細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
5)組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎,3000轉離心10分鐘取上清。
6)保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
常見問題解析:
1.加樣量不*?
解決方法:樣品稀釋前應充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
2.樣品數量多少不一,加樣時間有長有短?
解決方法:重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近。
3.保溫時間不*,洗滌條件不*,操作人員不*?
解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應盡可能與上次保持*,以排除這些因素造成的不*的可能性。
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有:①標本因素;②試劑因素;③操作因素。
TRAIL,小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體酶聯免疫試劑盒應用領域:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
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