詳細介紹
一、人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒詳細參數
規格:96T
品牌:RD
保存條件:2-8℃低溫保存
保質期:六個月
【Elisa貨期】現貨
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【ELISA試劑盒】提供免費檢測服務:使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據實驗工作量和難易程度,雙方協定實驗周期,保質保量完成委托實驗,并將實驗結果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。
二、人腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒實驗中zui可能出現問題
一、所有孔未顯色?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、用錯試劑。
3、在操作中忘記加酶或抗體。
解決辦法:
1、檢查洗板器械,比如洗板機管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前,要看清瓶簽。
3、嚴格按說明書操作步驟進行實驗,確保每步都到位。
二、所有孔顯色偏低?
分析原因:
1、微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。
2、洗板不干凈。
3、抗體污染了酶結合物等其它試劑。
4、溫度沒達到要求。
5、每孔加入的試劑量低于說明書要求量。
解決辦法:
1、手工加蒸餾水洗板時,要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。
2、洗板時要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。
3、嚴格按說明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。
4、控制孵育溫度在25℃。
5、加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時務必將吸頭內液體打盡。
Elisa實驗前的準備
1仔細閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內
3按說明書確定所有試劑齊全(數量、體積)
4標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內無法實驗者,注意低溫保存
5準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等
6根據檢測標本數量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
DIY夾心法ELISA常見技術指南
8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規提供的范圍進行操作。
10標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據每批說明書中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。
12為了優化靈敏度,建議過一夜孵育標準品和標本。
13若使用過氧化物酶作為顯色系統,應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
14當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.
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