技術(shù)文章
中科院胡老師反饋ELISA實(shí)驗(yàn)問題已提交技術(shù)部處理
閱讀:922 發(fā)布時(shí)間:2015-12-9中國科學(xué)院高能物理研究所胡老師十月底在我司訂購了人Human(NGAL)elisa kit。昨日老師反應(yīng)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)做完,但是反應(yīng)試劑盒除了滴加自帶的標(biāo)準(zhǔn)物孔顯色外,其他的加樣孔都沒有顯色。胡老師并說明了實(shí)驗(yàn)樣本都是血清樣,其中部分樣本稀釋了一百倍,有幾個(gè)血清樣加了高濃度的NGAL。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果不顯色特我司技術(shù)出現(xiàn)這問題的可能原因?
經(jīng)技術(shù)溝通交流后胡老師同意將剩余試劑盒試劑及樣本交由我司安排技術(shù)進(jìn)行復(fù)測(cè)分析原因所在。現(xiàn)我司已收到老師的剩余樣跟試劑,且已安排技術(shù)人員進(jìn)行復(fù)測(cè),并根據(jù)復(fù)測(cè)結(jié)果答復(fù)胡老師出現(xiàn)該情況的具體原因。
與此同時(shí)我司技術(shù)提出了如下的可能原因:
1.試劑已過效期,或不同試劑盒組分混用
2.錯(cuò)加、漏加試劑底物、顯色劑 A或B。
3.洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力。
4.終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜锞彌_液配制。
5.蒸餾水有問題。
正確的解決對(duì)策
1.實(shí)驗(yàn)前檢查試劑的組分及批號(hào),確認(rèn)未過期以及所有組分均屬對(duì)應(yīng)的試劑盒。不同試劑盒或不同批號(hào)的試劑不能混用。
2.嚴(yán)格按說明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現(xiàn)象
3.確認(rèn)盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認(rèn)配制洗液的容器已洗干凈。
4.每次配制時(shí)都應(yīng)看清標(biāo)簽標(biāo)明物質(zhì)。
5.確認(rèn)配制洗液的純化水達(dá)到要求且未污染,與好蒸餾水比較。