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資深專家對于Elisa試劑盒的詳細審查評價
閱讀:1387 發布時間:2014-9-29資深專家對于Elisa試劑盒的詳細審查評價
Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。是一種十分常用的定性定量方法,人體和動物、體外細胞培養中超過80%蛋白定量都使用其作為檢測的手段。ELISA試劑盒價格一般非常昂貴,但各家試劑公司的質量卻良莠不齊。ELISA的試劑盒有用于科研的,也有用于臨床診斷的。應用于臨床診斷的試劑盒必須有衛生部的許可文號,國家對應用于臨床診斷的試劑盒有嚴格的規定和要求,制定相關的手則來管理試劑盒的質量。 仔細閱讀說明書,對說明書的內容有一個詳細的了解。
審查內容包括:
1. 試劑盒的名稱:ELISA試劑盒名稱一般由“(物種)+(測定指標)+酶聯免疫試劑盒(ELISA)”,物種和測定指標不能搞錯,否則買錯了就是你的事情;另外有的試劑盒說明書試劑盒名稱明顯與寫在試劑盒上的名稱不符,這要引起你的警惕。
2. 用途:應用于科研還是臨床診斷,用于臨床診斷的有衛生部的批準文號。
3. 測定原理:現在ELISA試劑盒除非是測定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數用的是增強的雙抗體夾心法,即使用生物素-親和素系統,還有少數的指標可能使用競爭法,這類方法適用于半抗原的測定。具有復雜結構的多表位蛋白抗原,其雙抗體夾心法中的一個抗體必須用單抗,否則背景很高。當然如果兩個都是單抗(這兩個單抗針對不同表位),那么測定的線性范圍就較寬,試劑盒性能就較好;一個用單抗,一個用多抗,測定的靈敏度會較高。某些簡單的化合物用ELISA測定時,因為沒有兩個或以上的表位,一般只能作為半抗原,只能用競爭法測定。如果你發現有測定簡單化合物(如雌激素、NO、等)用雙抗體夾心法作測定原理時,這個試劑盒你就要懷疑了。另外還要說明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區別。 一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形,隨著待則標本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后,測定吸光度即隨抗原濃度的增加而開始下降直至不顯色,即所謂的“鉤狀效應”(hook eHect),也就是我們在免疫沉淀試驗中所稱的“帶現象”(zone phenomenon)。所以當使用一步雙抗體夾心法時,樣品濃度太高,有時會出現測不出來的現象,此時要作適當的稀釋才能準確測定。
4. 試劑盒的組成:用雙抗體夾心法作為測定的方法時,試劑盒的組成一般包括: 已包被單抗的酶標板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,外面有鋁箔袋密封,打開后有干燥劑,實驗時暫未使用的酶標條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。 而應用于科研的試劑盒,國家則沒有出臺相關的質量管理規定,因此試劑盒質量也就無法保障。在這種情況下,許多劣質的試劑盒在市面泛濫,不少同行戰友為此浪費了大量的時間和金錢,卻沒有得到一個良好的實驗結果。上海恒遠生物科技有限公司是一家專注于生物科學和生物技術領域的企業,企業經營進出口生物試劑、elisa試劑盒、抗體等,所經營銷售的范圍也在日益的增長和擴大。直銷的關鍵是銷售(機會和產品),銷售的重點是產品,產品的核心是價格。價格平民化就意味著競爭優勢。上海恒遠生物有限公司強調,讓消費者買的便宜、物超所值。保證。