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ELISA洗滌方法大揭秘
閱讀:4518 發布時間:2019-4-17上海恒遠專注科研試劑盒的研發及銷售多年,涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域,滿足您實驗所需,以實現與客戶的雙贏,完善的庫存及供應體系以及穩定的專業技術,保證產品均能現貨供應。期待您前來咨詢選購。近日,客戶介紹自己在洗板操作過程遇到棘手問題,麻煩我司技術給她提供解決處理方法及建議。主要問題如下:
問題一:說明書上說洗板時要把孔里的水甩干,可我做的時候,無論我怎么拍,孔底還是有殘留液體,請問這對試驗有沒有影響?或著有沒有別的什么好的辦法可以解決這個問題?
答:有一定的影響.尤其二抗反應后洗滌不好,會出現非特異.ELISA試驗中洗滌是關鍵.盡可能甩干,而且盡量少拍,不一定每次都很干,但是后一次洗滌要盡量干。洗滌中另一個值得注意的是盡量不要出氣泡。如果有條件的話,可用洗板機。
問題二:什么才叫封閉好了呢?有沒有什么標準?
答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果還有非特異反應的話,可能有其他原因,比如加樣時濺到了壁上或有氣泡,洗滌不充分,二抗濃度過高,封閉物不合適以及反應條件是否得當等。
問題三:1%bsa,你是用什么稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結果封閉的效果都不怎么明顯,與不封閉差不多。
答:1%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作,背景高不一定是封閉的問題。
ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點
一、手工洗板方法
吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。
二、自動洗板
如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等。
恒遠是一家生產和銷售科學研發用試劑產品公司,領域涵蓋化學、分析化學、生命科學和材料科學等基礎創新領域,助力客戶的研究計劃,在廣大科研用戶的幫助和支持下,經過不懈的努力,以過硬的產品質量和好的服務態度,為客戶提供一個穩定平臺,成為客戶可信賴的長期合作伙伴。