詳細介紹
●ELISA試劑盒,ELISPOT試劑盒
產品名稱:大鼠凋亡相關因子
英文名稱:Rat Factor-related Apoptosis,FAS ELISA KIT
可測種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬…
可測標本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液
規格:96T/48T 中英文雙版說明書 提供代測 科研試劑
經營品牌:RD、RB、IBL
保存條件:2-8℃
操作步驟
用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。