詳細介紹
中文名稱 | 總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒(DPPH法) |
規格 | 96樣 |
貨號 | P-860-SH |
價格 | 面議 |
樣本類型 | 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養上清液等 |
檢測范圍 | 詳見說明書 |
檢測方法 | 微量法 |
貨期 | 3-5天 |
說明書 | 咨詢我司業務員獲取 |
文獻 | 咨詢我司業務員獲取 |
注 意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
研究意義:
測定對象中各種抗氧化物質和抗氧化酶等構成總抗氧化水平。在生物學、醫學和藥學研究中常常檢測血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測定原理:
DPPH·為穩定的自由基 ,溶于甲醇,乙醇等極性溶劑中,在 515nm 處有最大吸收。向DPPH·溶液中加入抗氧化劑時,會發生脫色反應,因此可用吸光度的變化并以 Trolox 作為對照體系量化抗氧化物質的抗氧化能力。
自備實驗用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機、酶標儀、96 孔板和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 120mL×1 瓶,使用前預冷。
試劑一:液體 45mL×1 瓶,避光保存。
樣品的制備:
(1) 血清、血漿、唾液或尿液等液體樣品
血漿(制備時可以使用肝素或檸檬酸鈉抗凝,不宜使用 EDTA 抗凝)4℃,5000rpm 離心10min,取上清待測。血清、唾液或尿液樣品直接用于測定,也可以-80℃凍存(不宜超過30 d)后再測定。
(2) 組織樣品
按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL提取液)進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
(3) 細胞樣品
按照細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入1mL 提取液),冰浴超聲波破碎(功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);10000g,4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
操作步驟:
1、酶標儀預熱 30min,調節波長至 515nm。
2、操作表(在 EP 管中反應)
空白管 | 測定管 | |
提取液(μL) | 20 | |
樣品(μL) | 20 | |
試劑一(μL) | 380 | 380 |
充分混勻,室溫避光反應 20min,取 200μL 至 96 孔板測定 515nm 吸光值,△A= A空白-A測定 |
注意:空白管只需測定一次,若A測定小于 0.2,需用提取液稀釋后檢測。