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                                                     上海恒遠生物科技有限公司ELISA檢測服務說明

◇服務內容：
凡購買本司目錄任何一種檢測試劑盒（酶聯免疫、免疫組化、放射免疫），您只需將需要檢測的動物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……）種類和檢測指標（介素類、因子類）及標本數量（48T/96T）通知我司業務人員即可。在接到客戶標本當日起，一周內將檢測報告交到客戶手中
◇質量保證：
檢測用所有試劑全部都為進口試劑，適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本，靈敏度*，多年專業酶免服務，我們保證對所售任何產品一概負責到底，每一份實驗結果都真實可靠！

◇注意事項：
在收集標本前都必須有一個完整的計劃，必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測，對收集后當天就進行檢測的標本，及時儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，請造模取材后，將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差，蛋白極易降解，直接影響實驗質量，所以避免反復凍融。代測放免標本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書，具體操作注意事項請與我司技術人員溝通。

◇液體類標本：
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
*血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
*血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
*尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
*細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
*組織標本：
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

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ELISA方法簡介
1.包被抗原：稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液，多肽濃度2ug/ml，0.1ml/孔，4ºC過夜，洗凈。
2.1%BSA （pH 9.6 碳酸鹽緩沖液） 封閉，0.1ml/孔，37ºC1h，洗凈。
3.稀釋抗血清（可稀釋不同濃度） 0.1ml/孔，37ºC 30分鐘，洗凈。
4.稀釋辣根過氧化物每標記的二抗 0.1ml/孔，37ºC 40分鐘，洗凈。
5.顯色
A液：四甲基聯苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍.
B液：5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml 。
終止液：2N硫酸
A液、B液各一滴，比光顯色10分鐘，終止液一滴。
6.450nm 波長 測OD值

公司： www.hyelisa.com