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Graves 病患者外周血淋巴細胞 NF-κB p65 活性與血清丙二醛水平升高

張海三 張紅星 張姣媚 劉保平

摘 要 目 的 ： 探 討 Graves （GD） 病 患 者 血 清 丙 二 醛 （MDA） 水 平 及 NF-κB p65 亞 基 活 性 ， 了 解 其 免疫、氧化應激狀態 。 方法：納入 GD 患者（患者組）90 例與健康對照（對照組）82 例，放射免疫方法檢測其血 清 FT3 、FT4、TSH 及 酶 聯 免 疫 吸 附 法 （ELISA）測 定 MDA 水 平 及 淋 巴 細 胞 NF-κB p65 活 性 。 應 用 SPSS13．0 統 計 軟 件 進 行 數 據 處 理 ，t 檢 驗 分 析 患 者 組 與 對 照 組 血 清 FT3 、FT4、TSH、MDA 水 平 及 淋 巴 細 胞 NF-κB P65 活性，pearson 相關分析它們之間的相關性。結果：對照組與患者組血清 FT3、FT4、TSH 水平差異有顯著性，P值均小于 0．001；兩組間血清 MDA 水平比較差異有統計學意義，t ＝ －19．91，P ＝ 0．000；兩組間淋巴細胞 NF-κB p65 活性比較差異有統計學意義，t ＝ －19．84，P ＝ 0．000。 患者組血清 MDA 水平與血清 FT3、淋巴細胞 NF-κB p65 活性正相關（r 值分別為 0．354、0．661，P 值分別為 0．001、0．000），與 TSH 負相關（r ＝ －0．261，P ＝ 0．013 ） ，與 FT4 不 具 有 統 計 學 意 義 的 相 關 （r ＝ 0．104 ，P ＝ 0．329 ） 。 NF -κB p65 活 性 與 FT3 正 相 關（r ＝ 0．287，P ＝ 0．006）；與 FT4 和 TSH 無 統 計 學 意 義 的 相 關 性 。 結 論 ：GD 患 者 外 周 血 淋 巴 細 胞 NF-κB活 性 及 血 清 MDA 水 平 增 高 ，與 GD 嚴 重 程 度 相 關 ，減 少 氧 化 應 激 與 免 疫 損 傷 應 成 為 GD 治 療 過 程 中 考慮的重要因素。

關鍵詞 Graves ?。?氧化應激； 免疫損傷； 丙二醛； 核轉錄因子

彌漫性毒性甲狀腺腫 （Graves disease，GD）是內分泌疾病甲狀腺功能亢進癥 （甲 亢 ）的 主 要臨 床 類 型 之 一 。 多項研究提示患者外周血中甲狀 腺 相 關 抗 體、多種免疫球蛋白及多種細胞因子水 平 異 常 ［1 －2 ］，因此被認為是一種自身免疫性疾病。

真核生物中的核轉錄因子 NF-κB，是 由 復 雜的多肽亞單位組成的蛋白家族，作為信號傳導途徑 中 的 樞 紐，參與多種生物過程 ，對 氧 化 應 激 較為 敏 感，可以引起一系列細胞因子轉錄改變級聯反 應。 GD 患者存在甲狀腺濾泡破壞 ，使 甲 狀 腺素 異 常 釋 放，這一過程中也可能產生氧化應激損傷［3］，激 活 由 NF-κB 介導的細胞損傷［4 ］。 丙 二 醛（malonaldehyde，MDA） 可反映體內脂質過氧化 程度，間接反映細胞損傷程度，是氧化應激損中的重要因子。本研究通過檢測 GD 患者外周血淋巴細胞NF-κB 活 性 及 血 清 MDA 水 平， 分 析 二 者 變 化 關系， 了解免疫調節異常及氧化應激損傷在該病中的作用。

1 對象與方法

1．1 研究對象 患者組來自 2005 年 2 月至 2009年 2 月在甲狀腺疾病門診*就診的 GD 患者 90例，符合 ICD-10 GD 患者診斷標準，具有典型的甲亢癥狀：怕熱，多汗，納差，消瘦，心悸等，血清 FT3、FT4 升高，TSH 降低；甲狀腺攝碘率高，核素掃描攝锝明顯增強。 甲狀腺彩超呈“火海征”；病程不超過2 年，其中男 31 例，女 59 例，年齡 25 ～ 40 歲，平均（31．7 ± 4．38）歲；病程 0．5 ～ 7 個 月，中 位 數 1．4 個月，平均（1．7 ± 1．31）個月。 對照組 82 例來自健康體 檢 人 群，與患者年齡匹配，其 中 男 30 例，女 52例，年齡 25 ～ 40 歲，平均（31．7 ± 4．46）歲。 以上受檢者均排除骨關節疾病、 其他內分泌代謝疾病以及肝腎功能不全者， 排除妊娠或服用某些影響甲狀腺功能藥物者。獨立樣本 t 檢驗分析甲亢組與對照組間年齡比 較：t ＝ －0．109，P ＝ 0．913； 性 別 構 成 χ2 檢 驗 比較：χ2 ＝ 0．086，P ＝ 0．769。所有病例與對照均經過河南省倫理委員會的批準并簽署正式書面知情同意書。

1．2 研究方法

1．2．1 標 本 準 備 均于晨起空腹采肘靜脈血 5mL，3 mL 普通管，以 2 000 r ／ min 離 心 2 min，取 上層血清－80 ℃低溫保存，統一測定 FT3、FT4、TSH 和MDA；2 mL EDTA 抗凝，以 2 000 r ／ min 離 心 5 min用于分離淋巴細胞，測定 NF-κB P65 活性。

1．2．2 FT3、FT4、TSH 測 定 采 用 放 射 免 疫 法，應用 γ 計數儀（國營二六二廠，PS2008）測定 FT3、FT4和 TSH，FT3 試劑盒靈敏度為 0．1 p mol ／ L，特異性：抗 T3 血 清 與 T4、rT3、T1、T2 交 叉 反 應 率 均 ＜ 0．001，平均批內變異度 （CV） ＜ 10％， 平 均 批 間 CV ＜15％；FT4 試 劑 盒：靈 敏 度 為 0．58 pmol ／ L，特 異 性：抗 T4 血 清 與 T3、rT3、T4、T2，水 溶 酸 鈉、阿 斯 匹 林 交叉反應 率 均 ＜ 1 × 10－4，平 均 批 內 CV ＜ 10％，平 均批間 CV ＜ 15％； TSH 試劑盒：靈敏度為 0．1 mIU ／ L，平均批內 CV ＜ 8．7％，平均批間 CV ＜ 10．9％。

1．2．3 MDA 測定 應用人 MDA 酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbnent assay， ELISA）快 速檢 測 試 劑 盒 （購自上海恒遠生物科技有限公司，MDA2003）測 定 血 清 MDA 水 平，依據試劑盒說明書進行操作。

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