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恒遠文獻:垂直振動對大鼠腰椎小關節退變及骨密度影響的實驗 研究
閱讀：252 發布時間：2020-4-2垂直振動對大鼠腰椎小關節退變及骨密度影響的實驗研究
劉博1 高天君2* 馬遠征2 王亮2 黎立2
1． 河北北方學院，河北 張家口 0750002． jie放軍第 309 醫院，北京 100091
中圖分類號: Ｒ681. 5 + 3 文獻標識碼: A 文章編號: 1006-7108( 2016) 10-1246-05
摘要: 目的 觀察大鼠腰椎小關節突在不同振動頻率下關節軟骨退變程度及腰痛相關因子的表達情況，同時探究振動對骨密度的影響。方法 收集對照組和振動組( 振動組接受 15 min/ d，頻率 5 ～ 60 Hz、振幅 3 mm 的垂直振動 12 w) 大鼠腰椎小關節軟骨，采用 HE 染色和 AB-PAS 染色，進行 Mankin 評分評價軟骨退變程度; 免疫組化染色觀察凋亡軟骨細胞、COX-2、PGE2、CII 在小關節突軟骨表達; 雙能 X 線吸收法測量振動前后股骨頸骨密度。結果 對照組、5 Hz 振動組、20 Hz 振動組、60 Hz 振動組小關節 Mankin 評分依次增加，有顯著性差異( P ＜ 0. 05) ; 組間凋亡軟骨細胞、COX-2、PGE2 表達隨著振動頻率增加而顯著性增強( P ＜ 0. 05) ; 對照組與 5Hz 振動組 CII 表達差異不明顯( P ＞ 0. 05) ，其余各組間 CII 表達差異明顯( P ＜ 0. 05) ; 組間骨密度增加值無顯著性差異。結論 長時間垂直振動可導致軟骨退變，振動頻率越大，小關節退變越重; 振動與致痛因子表達具有相關性; 5 ～ 60 Hz、3 mm 振幅振動不能促進幼齡大鼠 BMD 增加。
關鍵詞: 振動; 腰椎小關節; 免疫組化; 原位末端標記法腰痛是患者就診zui常見的癥狀之一，直升機駕駛員、汽車駕駛員等人群中發病率較高。腰痛zui常見的致病因素包括退行性骨關節炎( osteoarthritis，OA) 、椎間盤源性腰痛等［1］。其中 OA 的主要病理變化是關節軟骨退變，其致病因素較多，常見的有炎癥介質、異常機械應力等。有研究［2］發現異常應力可影響腰椎小關節正常的軟骨組成，從而導致關節軟骨退變，且退變程度與應力施加時間呈正相關。在少有的研究中，垂直振動作為應力的一種特殊形式，其對腰椎小關節退變及骨密度影響被列入本研究。
1 材料和方法
1. 1 實驗動物6w 齡 Sprague-Dawley 雄性大鼠 40 只，SPF 級，體重( 210 ± 10) g( jie放軍軍事醫學學院動物中心提供) ，合格 證 號 為 SCXK-( 軍) 2012-0004。實 驗 經309 醫院動物實驗倫理委員會許可后實施。
1. 2 腰椎小關節退變動物模
1. 2. 1 動物分組: 隨機抽簽分組: 對照組 10 只，編號為 A; 振動實驗組 30 只，分為 3 組，每組 10 只，編號為 B、C、D，各組放入相同環境中單籠飼養。
1. 2. 2 建立模型: ①A 組不做特殊處理。②將振動各組大鼠分批放入振動訓練臺的特制容器內，大鼠呈直立位，分別對 B 組、C 組、D 組施加 5、20、60 Hz垂直振動，每組振動 15 min / d，振幅峰值為 3 mm，連續 12 w。在振動前后，用 5% 水合氯醛( 7 mL / kg) 經腹腔麻醉大鼠，雙能 X 線吸收法測量股骨頸 BMD。
1. 2. 3 取材和處理: 耳緣靜脈空氣栓塞法處死各組大鼠，收集 L5-L6 腰椎小關節軟骨; 4% 多聚甲醛溶液固定 24 h。15% 乙二胺四乙酸脫鈣 7d。流水沖洗 24 h。梯度酒精脫水后二甲苯透明，石蠟包埋。六張為一組連續切片，層厚 4 ～ 5 μm，樹膠封固。試劑來源: 細胞凋亡檢測試劑盒由上海羅氏制藥公司提供; 兔抗大鼠環氧化酶 2 抗體、兔抗大鼠 CollagenII 抗體、DAB 顯色試劑盒、SABC 免疫組化試劑盒、AB-PAS 染液由武漢博士德生物工程有限公司提供，兔抗大鼠前列腺素 E2 抗體由上海恒遠生物科技公司提供，余試劑由jie放軍 309 醫院動物實驗室提供。
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