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免疫膠體金銀染色和其它免疫細(xì)胞化學(xué)方法一樣，要想得到好的染色效果，關(guān)鍵取決于標(biāo)本處理是否適當(dāng)，只有使抗原性及組織結(jié)構(gòu)保存的好，才能使后續(xù)的染色成功成為可能，其次要用高特異性和價(jià)的一抗，選擇合適的稀釋度。由于免疫組化方法廣泛應(yīng)用于不同的生物學(xué)科，所要檢出的抗原種類繁多，性質(zhì)也各不相同。因此，不可能有一種適用于所有抗原的固定劑，而是根據(jù)不同的抗原性質(zhì)區(qū)別對(duì)待。根據(jù)我們使用的固定劑介紹如下，僅供參考。

固定劑的選擇及其相應(yīng)的固定時(shí)間

（1）酶：冰凍切片不固定，或用95%乙醇，固定時(shí)間為10min。

（2）激素：冰凍切片、涂片、印片，不固定或bing酮、甲醇、乙醇、PEG固定。固定時(shí)間為4℃*30min。

（3）免疫球蛋白：中性福爾馬林、四lv化碳（1%甲醛），固定時(shí)間為30min。

（4）白蛋白：95%乙醇含1～5%冰醋酸。固定時(shí)間為30min。

（5）纖維蛋白原：95%乙醇含1%～5%冰醋酸。固定時(shí)間為30min。

（6）病毒：bing酮、100%乙醇、甲醇、yi醚。固定時(shí)間為30min。

（7）糖蛋白：PLP、bing酮。固定時(shí)間為30min。

（8）脂質(zhì)： Forssman 中性福爾馬林。固定時(shí)間為20min。

（9）抗原： 2.5%硫代硫酸鈉，冰凍切片不固定。固定時(shí)間為20min。

（10）免疫電鏡：PLP、戊二醛、戊二醛-多聚甲醛、ECD-G等。固定時(shí)間為30min。

切片的處理與粘附

免疫組化染色過程較復(fù)雜，洗滌的次數(shù)較多，而且均需振蕩洗滌，抗原片粘貼不牢，往往在zui后的時(shí)刻，還沒有等顯色就會(huì)脫落導(dǎo)致前功盡棄，這個(gè)環(huán)節(jié)雖小卻會(huì)影響大局。因此，為了保證切片染色成功，必須把切片處理好，解除脫片的后顧之憂。