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lipo2000轉染試劑使用問題解答

閱讀:454          發布時間:2015-6-17
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lipo2000是各大實驗室,科學院,技術實驗室zui常用的轉染試劑,小小的試劑,價格不菲,經常聽到客戶說嚴格按照說明書來操作,還會出現這樣或者那樣的問題。客戶經常抱怨東西貴,還做不出好效果。


1. Lipo2000的保存:4保存和運輸


2. Lipo2000的活性:由于Lipo2000是生物蛋白,在4保存和運輸,所以就算是同


一個批號的Lipo2000,只有在剛出廠分裝時活性才是相同的。經過供應商的保存、


運輸(運輸的溫度控制各不相同),其活性將有細微的變化。


3. Lipo2000的優化: 


3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同,其實就算是同一管,使用的時間長了,后期的活性跟剛開始用時也不太一樣,所以在拿到一管新的Lipo2000時,一定要做一下活性優化;


3.3 如果一直使用Lipo2000做實驗,優化的步驟可以簡化:


假設之前轉化時每孔一直用4ul Lipo2000,那么優化的步驟可以簡化為只用5個孔,每個孔中Lipo2000用量分別為3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul,其他條件不變,看那個Lipo2000的用量結果,接下來的實驗就用優化的用量。


4. Lipo2000的使用:


4.1 使用前將整管的Lipo2000混勻,分裝,分成100ul/管;

4.2 實驗前,將分裝好的100ul Lipo2000和質粒DNA(或RNA)放到實驗臺上室溫平衡,不需要冰上保存;

4.3 Opti-MEM培養基放到水浴鍋中37平衡;

4.4 按照說明書進行轉染,注意控制好每一步操作的時間。


5. 切記并不是Lipo2000的用量越多越好,實際上,Lipo2000加多了,毒性會增加,細胞會死亡,轉化效率會大幅降低。


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