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對(duì)試劑盒供應(yīng)商的選擇與產(chǎn)品評(píng)價(jià)總結(jié)
閱讀:281 發(fā)布時(shí)間:2014-12-25提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 68.5KB |
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大家知道ELISA是一種十分常用的定性定量方法,人體和動(dòng)物、體外細(xì)胞培養(yǎng)中超過(guò)80%蛋白定量都使用其作為檢測(cè)的手段。今天我們來(lái)看看對(duì)試劑盒供應(yīng)商的選擇與產(chǎn)品評(píng)價(jià)總結(jié):
*、應(yīng)用于臨床診斷的試劑盒
必須有衛(wèi)生部的許可文號(hào),國(guó)家對(duì)應(yīng)用于臨床診斷的試劑盒有嚴(yán)格的規(guī)定和要求,制定相關(guān)的手則來(lái)管理試劑盒的質(zhì)量。
第二、用于科研的試劑盒
國(guó)家則沒(méi)有出臺(tái)相關(guān)的質(zhì)量管理規(guī)定,因此試劑盒質(zhì)量也就無(wú)法保障。在這種情況下,許多劣質(zhì)的試劑盒在市面泛濫,不少同行戰(zhàn)友為此浪費(fèi)了大量的時(shí)間和金錢(qián),卻沒(méi)有得到一個(gè)良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。下面給戰(zhàn)友們介紹一下如何判斷試劑盒的質(zhì)量,選購(gòu)好的試劑盒。
1. 仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),對(duì)說(shuō)明書(shū)的內(nèi)容有一個(gè)詳細(xì)的了解。
2. 審查內(nèi)容包括:
① ELISA試劑盒名稱一般由“物種+測(cè)定指標(biāo)+酶聯(lián)免疫試劑盒",物種和測(cè)定指標(biāo)不能搞錯(cuò),否則買(mǎi)錯(cuò)了就是你的事情;另外有的試劑盒說(shuō)明書(shū)試劑盒名稱明顯與寫(xiě)在試劑盒上的名稱不符,這要引起你的警惕。
② 用途:應(yīng)用于科研還是臨床診斷,用于臨床診斷的有衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號(hào)。
③ 測(cè)定原理:現(xiàn)在ELISA試劑盒除非是測(cè)定抗體的以外,一般使用的是雙抗體夾心法,此種方法大多數(shù)用的是增強(qiáng)的雙抗體夾心法,即使用生物素-親和素系統(tǒng), 還有少數(shù)的指標(biāo)可能使用競(jìng)爭(zhēng)法,這類(lèi)方法適用于半抗原的測(cè)定。具有復(fù)雜結(jié)構(gòu)的多表位蛋白抗原,其雙抗體夾心法中的一個(gè)抗體必須用單抗,否則背景很高。當(dāng)然 如果兩個(gè)都是單抗,那么測(cè)定的線性范圍就較寬,試劑盒性能就較好;一個(gè)用單抗,一個(gè)用多抗,測(cè)定的靈敏度會(huì)較高。某些簡(jiǎn)單的化 合物用ELISA測(cè)定時(shí),因?yàn)闆](méi)有兩個(gè)或以上的表位,一般只能作為半抗原,只能用競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)定。如果你發(fā)現(xiàn)有測(cè)定簡(jiǎn)單化合物用 雙抗體夾心法作測(cè)定原理時(shí),這個(gè)試劑盒你就要懷疑了。另外還要說(shuō)明一步雙抗體夾心法與兩步雙抗體夾心法的區(qū)別。
一步雙抗體夾心法的吸光度-劑量曲線呈鐘形,隨著待則標(biāo)本中抗原濃度的增加而升高至一定程度后,測(cè)定吸光度即隨抗原濃度的增加而開(kāi)始下降直至不顯色,即所 謂的“鉤狀效應(yīng)",也就是我們?cè)诿庖叱恋碓囼?yàn)中所稱的“帶現(xiàn)象"。所以當(dāng)使用一步雙抗體夾心法時(shí),樣品濃度太高,有時(shí)會(huì)出現(xiàn)測(cè)不出來(lái)的現(xiàn)象,此時(shí)要作適當(dāng)?shù)南♂尣拍軠?zhǔn)確測(cè)定。
④ 試劑盒的組成:用雙抗體夾心法作為測(cè)定的方法時(shí),試劑盒的組成一般包括:已包被單抗的酶標(biāo)板:一塊,有96孔的,也有48孔的,可拆缷,外面有鋁箔袋密封,打開(kāi)后有干燥劑,實(shí)驗(yàn)時(shí)暫未使用的酶標(biāo)條要連帶干燥劑密封好,放在4℃冰箱中妥善保存。