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進口試劑盒實驗需要考慮的方面

閱讀:200          發布時間:2014-5-6
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進口試劑盒實驗需要考慮的方面
    1、標本在保存中如出現細菌污染所致的混濁或絮狀物時,應離心沉淀后取上清檢測。
    2、血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長時間保存,應在-70℃以下。
    3、樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。
    4、在冰凍保存的血清標本須注意避免因停電等造成的反復凍融。標本的反復凍融所產生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子產生破壞作用,從而引起假陰性結果。此外,凍融標本的混勻亦應注意,不要進行劇烈振蕩,反復顛倒混勻即可。
    5、要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色。
實驗過程注意
    1、當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
    2、不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
    3、請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
進口試劑盒實驗結果判斷
    1、陰性對照呈無色或淺黃色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗有效。
    2、以空白對照調零,用酶標儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度(A值)。待檢孔A值大于陰性對照A值平均值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值的平均值低于0.08時按0.08計算。

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