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細(xì)胞內(nèi)成分檢測樣本收集方法
閱讀:1906 發(fā)布時間:2015-5-19細(xì)胞內(nèi)成分檢測樣本收集方法
細(xì)胞: 檢測細(xì)胞的成份時,對于貼壁細(xì)胞,去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加
入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后,細(xì)胞
就會被裂解。對于懸浮細(xì)胞,離心收集細(xì)胞,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝然后再裂解。充分裂解后,10000-14000g離心3-5 分鐘,取上 清,即可進(jìn)行后續(xù)操作。
可用作 ELISA 測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液)、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定,有些 則需經(jīng)預(yù)處理。