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客戶咨詢ELISA常見問題

1. 產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格？可檢測多少個樣本？
產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。
每次實驗的標準曲線一般設(shè)5個不同濃度，加上空白孔，標準曲線一共需要11個孔。因此，一個48T試劑盒zui多可以測定37個樣本（不做重復(fù)且一次用完），一個96T試劑盒zui多可以測定85個樣本（不做重復(fù)且一次用完）。可以根據(jù)實際樣本數(shù)量和實驗計劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。

2.48T和96T的試劑盒有哪些不同？
48T和96T的試劑盒，每個孔的反應(yīng)體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格，詳見說明書。

3. 產(chǎn)品的穩(wěn)定性如何？
產(chǎn)品在研發(fā)前期已通過嚴格的穩(wěn)定測試，發(fā)貨前亦須通過檢測并提供質(zhì)檢報告，在市場上深受廣大客戶的贊許！

4.貴公司有沒有酶活性檢測的試劑盒？
酶活力的測定實際上就是測定酶促反應(yīng)的速率。酶活力的大小即酶含量的多少，可以用每克酶制劑或每毫升酶制劑含有多少酶單位來表示，單位是U/g或U/ml。酶活力的測定方法：⑴測定完成一定量反應(yīng)所需的時間，⑵測定單位時間內(nèi)酶催化化學反應(yīng)量。主要通過產(chǎn)物的增加量或底物的減少量來測定。常用的方法有：⑴分光光度法，⑵熒光法，⑶同位素測定法，⑷電化學法。
ELISA的方法一般是對可溶性抗原或抗體進行定性和定量的檢測，所以酶活性是不能用ELISA來檢測的。

5.一次ELISA實驗需要多長時間？
雙抗體夾心ELISA法一次實驗需要4-4.5小時，競爭ELISA法一次實驗需要2-2.5小時。

6.血清樣本如何處理？
全血標本于室溫放置2小時或4℃guoye后于1000×g離心20分鐘。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

7. 血漿樣本如何處理？
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，于1000×g離心15分鐘，仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

8. 尿液樣本如何處理？
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

9.細胞上清液樣本如何處理？
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（1000×g）。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右（5000×g）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

10.   組織樣本如何處理？
用預(yù)冷的PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織，以去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣本對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g 離心5~10分鐘，取上清檢測。

11.為什么有的試劑盒是采用競爭ELISA法？
小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進行測定，可以采用競爭法。其原理是標本中的抗原和固相載體上的抗原競爭生物素化抗體上的結(jié)合位點，標本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，zui后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。

12.用什么軟件處理ELISA檢測的數(shù)據(jù)比較好？
ELISA標準曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便，可以漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。軟件可以在下載中心進行下載。

13. 試劑盒做的結(jié)果不理想怎么辦？
實驗結(jié)果不理想請及時與客服或，我們可以幫您一起分析實驗結(jié)果。如果僅憑實驗數(shù)據(jù)無法判斷，您可以將試劑盒發(fā)回給我們進行售后檢測。如果是試劑盒本身的質(zhì)量問題，可以為您退換貨；如果是實驗操作的問題，技術(shù)人員可以給您一些改進的建議。