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技術文章

保證ELISA試劑盒實驗結果的幾大基礎

閱讀:1031          發布時間:2014-12-16

    根據前面說到的ELISA質量控制中我們知道,由ELISA的性質和來源,分為可測誤差、隨機誤差、人為誤差。在ELISA試劑盒實驗中,只有遵循它應有的規則才能更好的完成實驗,對此,上海恒遠公司特別為您分析了保證實驗結果的幾大基礎:
  1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
  2.實驗時,要使底物避光保存。
  3.用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。     
  4.吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  5.要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進行確定。但有專業人員進行矯正。
  6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
    我公司從事試劑盒銷售多年,有著豐富的科研經驗,購買我司ELISA試劑盒全程提供技術指導,如客戶不方便實驗并可提供代測服務,我們承諾代測服務免費!

    ELISA試劑盒實驗基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。
    再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。在操作步驟中,還有這幾個必知項目: 
1. 溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
2. 將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。        
3. 洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
4. 洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫6作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
5. ELISA試劑盒實驗中,液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

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