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人過氧化氫酶試劑盒操作注意事項
閱讀:2267 發(fā)布時間:2011-10-21人過氧化氫酶試劑盒操作注意事項 本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中過氧化氫酶(CAT)的活性。 實驗原理: 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人過氧化氫酶(CAT)水平。用純化的過氧化氫酶(CAT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中加入過氧化氫酶(CAT),再與HRP標記的過氧化氫酶(CAT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過氧化氫酶(CAT)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人過氧化氫酶(CAT)的濃度。 人過氧化氫酶試劑盒注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值) ,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5) 。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存: ;2-8℃。
2.有效期:6個月