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干貨分享:LB培養(yǎng)基怎么配制?
閱讀:20826 發(fā)布時(shí)間:2020-9-9LB培養(yǎng)基,是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌,其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。加入抗生素的 LB 培養(yǎng)基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。
盡管該培養(yǎng)基的名稱(chēng)被廣泛解釋為L(zhǎng)uria-Bertani 培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(Giuseppe Bertani)的說(shuō)法,這個(gè)名字來(lái)源于英語(yǔ)的 lysogeny broth,即溶菌肉湯。
LB培養(yǎng)基的配制:
1.成分
胰蛋白胨(tryptone)10g
酵母提取物(yeast extract)5g
氯化鈉(NaCl)10g
固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g
加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH(約0.2ml)調(diào)pH至7.2,121℃滅菌30min
2.配制方法
①稱(chēng)量 分別稱(chēng)取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl,置于燒杯中。
②溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中,用玻棒攪拌,使藥品全部溶化。
③調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。
④定容 將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。
⑤加瓊脂 加入所需量瓊脂,加熱融化,補(bǔ)足失水。
⑥分裝、加塞、包扎。
⑦高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
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