技術文章
開學季討論:牛血清實驗操作步驟與材料需求
閱讀:1252 發布時間:2018-9-5牛血清中IgG、IgA、IgM的測定。本試驗主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補體成份的含量。以下為單向瓊脂擴散試驗的具體操作辦法,為需要者提供參考,歡ying來dian咨詢我司產品的具體價格。
·步驟
1.稀釋參考血清及待檢血清:參考血清用0.5ml蒸餾水溶解后使用,參考血清、待檢血清稀釋按要求進行。
2.加樣:將上述稀釋參考血清分別滴入相應的抗體免疫板的一排孔內,其余孔滴加待檢的稀釋血清,每個檢樣加兩個孔,每孔滴加10微升。
3.繪制標準曲線及血清標本中IgG、IgA、IgM定量測定:測量沉淀環直徑。
這種沉淀環直徑與抗原含量的關系不是直線相關,而是對數關系,這種關系有兩種計算方
法:
1.Mancini曲線-適用于大分子抗原和長時間擴散的結果處理。使用方格計算紙劃線,沉淀環直徑的平方與抗原濃度呈線性關系。
2.使用半對數紙劃線,濃度的對數與沉淀環之間呈線性關系。公式表示:logC/d=K。
終結論:免疫球蛋白的含量,不同批號的參考血清其免疫球蛋白含量不一。
·材料需求
IgG、IgA、IgM免疫板、參考血清、待檢血清、微量加樣器、量尺、紗布、生理鹽水、帶蓋方盤。