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酶聯(lián)免疫的條件與測(cè)定方法有什么關(guān)系
閱讀：1497 發(fā)布時(shí)間：2014-9-17 實(shí)驗(yàn)要在良好的環(huán)境中執(zhí)行操作，實(shí)驗(yàn)的條件也是非常重要的，而針對(duì)酶聯(lián)免疫測(cè)定的條件與其測(cè)定方法有著一定的關(guān)系，今天上海恒遠(yuǎn)就來(lái)和您說(shuō)說(shuō)它們之前有什么關(guān)系。
定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出有或無(wú)的簡(jiǎn)單回答，分別用陽(yáng)性、陰性表示。 表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)，陰性則為無(wú)反應(yīng)。
用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度，其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn)，呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義。
在間接法和夾心法ELSIA中，陽(yáng)性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽(yáng)性孔。
而酶聯(lián)免疫試劑盒的回收率與真實(shí)成分有緊密的關(guān)系，回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析過(guò)程中的損失的程度，損失越少，回收率越高，假如作標(biāo)液1PPM，就是1毫克/升，而作出尺度數(shù)據(jù)為0.99毫克/升，就是說(shuō)您的回收率是99%，這個(gè)說(shuō)明了方法的正確度。
·空白管陽(yáng)性高：
1.樣本本身就是陽(yáng)性樣本，換陰性樣本做回收率。
2.空白管在實(shí)驗(yàn)中被污染，實(shí)驗(yàn)中防止交叉污染。
3.水質(zhì)原因用，娃哈哈礦泉水代替。
·假陰、陽(yáng)性：
1.水質(zhì)原因：點(diǎn)復(fù)溶液驗(yàn)證，用娃哈哈礦泉水代替；
2.實(shí)驗(yàn)操作原因。吸取到其它相吹干，準(zhǔn)確的取液吹干。離心不*，延長(zhǎng)離心時(shí)間。樣本的污染，更換樣本乳化未處理*。溫浴（70℃）處理乳化現(xiàn)象；
3.儀器試劑原因。離心管未清洗干凈，正確的洗滌器具。有機(jī)溶劑的影響，做試劑空白看影響結(jié)果；
4.衍生化試劑原因（長(zhǎng)時(shí)間衍生化試劑變質(zhì)），更換衍生化試劑；
5.與曲線好壞相關(guān)，保證曲線的正常。
在從冰箱拿出的標(biāo)本要預(yù)溫至室溫，對(duì)冰凍的樣品要融化好，并充分混勻再用。假如忽視了影響其結(jié)果的因素，難免會(huì)造成假陰性或假陽(yáng)性。了解影響實(shí)驗(yàn)的因素，減少差錯(cuò)事故的發(fā)生是極其必要的。對(duì)不能及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本要妥善保留于4℃冰箱，做好原始記實(shí)，標(biāo)本管上標(biāo)上待檢者姓名、日期。
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