亚洲中文久久精品无码WW16,亚洲国产精品久久久久爰色欲,人人妻人人澡人人爽欧美一区九九,亚洲码欧美码一区二区三区

貝克曼庫爾特國際貿易(上海)有限公司

貝克曼庫爾特|NGS核酸純化之洗脫篇:用啥洗?加多少?洗多久?加熱嗎?

時間:2022-5-9 閱讀:1468
分享:

31.jpg

 

貝克曼庫爾特基于SPRI技術的AMPure XPSPRIselect兩種NGS文庫純化和片篩試劑。該技術采用順磁性的磁珠、選擇性的結合特定大小的核酸,被眾多主流建庫試劑盒及測序專家選用。

那么,金標準"還有優化的空間嗎?讓原廠來給您專業的分析:單從洗脫,有哪些優化的重點。

 

用什么洗?


32.jpg


如上圖所示Tris or TE buffer (+/-EDTA)中,洗脫得率相比于純水有了顯著提升。而PBS溶液(pH 6-8)的效果緊隨其后,且PH無顯著影響。這可能與PBS中的鹽離子的存在有關。另一方面,從穩定性(CV)上看,Tris\TE\PBS洗脫都優于水。

 

加多少?


33.jpg


如上圖所示:對比了不同加樣體積及洗脫體積的影響。所有的DNA起始濃度一致,因此洗脫體積越小,產物相對濃度越高(A);但是由于磁珠也會占用一部分洗脫溶液的體積(約1 µL),產物濃度越高則這部分損失越多(B);雖然小體積洗脫會得到影響核酸的得率,但是這并不是因為洗脫效率引起的:當投入量一致時,不同洗脫體積的得率無顯著差異(C)。

 

洗多久?加熱嗎?

34.jpg



如上圖所示:在1分鐘的時候,洗脫已經進入平臺期(非指數期)提示大多數核酸已經洗脫下來。不加熱的情況下,1分鐘與20分鐘洗脫相比,1分鐘的量顯著偏低(p < 0.01)。從2分鐘洗脫開始,無顯著差異。加熱至60度后,洗脫速度更快:1分鐘與其他時長無顯著差異。

 

小結

 

上述實驗通過使用lambda phage DNA (49 kb),對貝克曼庫爾特的SPRI技術磁珠進行測試,提示:

 

  • 長達49 kb的核酸片段2分鐘可以被充分洗脫。

  • 使用Tris溶液可以提升洗脫效率和穩定性。

  • 不同的起始及洗脫體積對洗脫效率影響不大。

  • 但是小體積的物理限制會導致更多核酸損失于死體積。

 


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話 產品分類
在線留言