固相萃取的基本原理和方法:
固相萃取技術基于液-固相色譜理論,采用選擇性吸附、選擇性洗脫的方式對樣品進行富集、分離、純化,是一種包括液相和固相的物理萃取過程;也可以將其近似的看作一種簡單的色譜過程。固相萃取是利用選擇性吸附與選擇性洗脫的液相色譜法分離原理。較常用的方法是使液體樣品通過一吸附劑,保留其中被測物質,再選用適當強度溶劑沖去雜質,然后用少量良溶劑洗脫被測物質,從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。也可選擇性吸附干擾雜質,而讓被測物質流出;或同時吸附雜質和被測物質,再使用合適的溶劑選擇性洗脫被測物質。
針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質),操作稍有不同。
1)填料保留目標化合物
固相萃取操作一般有四步:
Ⅰ、活化——除去柱子內的雜質并創造一定的溶劑環境。
Ⅱ、上樣——將樣品用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保留在柱上。
Ⅲ、淋洗——大程度除去干擾物。
Ⅳ、洗脫——用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。
2)填料保留雜質
固相萃取儀操作一般有三步:
Ⅰ、活化——除去柱子內的雜質并創造一定的溶劑環境。
Ⅱ、上樣——將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上。故此步驟要開始收集。
Ⅲ、洗脫——用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集。合并收集液。
以上便是今天關于注意注意啦,固相萃取小柱的操作流程就按照這三步來的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。