羊抗人IgG血清(健侖榮譽產(chǎn)品)
【簡單介紹】
【詳細說明】
羊抗人IgG血清
:
名 稱:羊抗人IgG
濃 度: 1mg/1ml
抗體來源(宿主):兔源多抗、鼠源
克 隆:單克隆抗體、多克隆抗體
適 用:Human, Mouse, Rat, Chicken
抗體類型:一抗
研究領域:細胞生物、神經(jīng)生物學等
性 狀:凍干粉或液體
保 存: Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature foR At least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable foR At least two weeks at 2-4 °C.
相關標記:FITC、Gold 、HRP、PE PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5 、PE-CY7 、RBITC 、 Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488 、 Alexa Fluor 555 、Alexa Fluor 647、AP 、APC 、Biotin 、Cy3 、Cy5 、Cy5.5 、Cy7 。
儲 存 液: Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4 or PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3. -20oC, Avoid freeze / thaw cycles.
羊抗人IgG優(yōu)質(zhì)供應,相關抗體:
JL-1800R Anti-PACAP-38抗體,腺苷酸環(huán)化酶激活肽-38抗體
JL-1801R Anti-GFRα-1/GDNF抗體,GDNF家族受體α-1抗體
JL-1802R Anti-ET-1抗體,內(nèi)皮素-1抗體
JL-1803R Anti-ACEI|血管緊張素1轉(zhuǎn)換酶抑制劑抗體
JL-1805R Anti-GHRF/GHRH抗體,生長激素釋放激素因抗體
JL-1806R Anti-TSHR 抗體,促甲狀腺素受體抗體(C端)
JL-1808R Anti-GLP-2抗體,胰高血糖素樣肽-2抗體
JL-1810R Anti-Tubulin-β抗體,微管蛋白
JL-1811R Anti-Shank1抗體,shank-1抗體
JL-1812R Anti-HEV抗體,戊型肝炎病毒抗體
JL-1813R Anti-HCV-NS4a抗體,丙型肝炎病毒-NS4a抗體
JL-1814R Anti-ICAD/DFF-45β抗體,Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑抗體
JL-1815R Anti-FAS/Apo-1/CD95抗體,載脂蛋白A1抗體
JL-1816R Anti-FasL抗體,FasL抗體
JL-1817R Anti-BFGF/FGF-2抗體,堿性成纖維細胞生長因子抗體
JL-1818R Anti-HCV-NS1抗體,丙型肝炎病毒-NS1抗體
JL-1819R Anti-HCV-NS3抗體,丙型肝炎病毒-NS3抗體
JL-1820R Anti-CT-R抗體價格好,降鈣素受體抗體
JL-17001 胰蛋白胨大豆肉湯 250 85 用于金黃色葡萄球菌的MPN測定,增菌培養(yǎng),NaCl濃度可根據(jù)需要而調(diào)整(GB、SN標準)
Trypticase (Tryptic) Soy Broth
JL-17002 Baird-Parker瓊脂基礎 250 225 用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標準)
Baird-ParkeR Agar Base
JL-17003 亞碲酸鹽卵黃增菌液 5ml*10 65 加入Baird-Parker瓊脂基礎中
Egg-Yolk lurite Emulsion
JL-17004 兔血漿 0.5ml*20 130 用于金黃色葡萄球菌凝固酶試驗
Rabbit Plasma
JL-17005 DNA酶瓊脂 100 360 用于核糖核酸酶檢測
單克隆抗體制備方法: (一)雜交瘤細胞的大量繁殖
克隆化的細胞可以在體外進行大量培養(yǎng),收集上清液而獲得大量的單一的克隆化抗體。不過體外培養(yǎng)法得到的單克隆抗體有限,其不能超過特定的細胞濃度,且每天要換培養(yǎng)液。而體內(nèi)雜交瘤細胞繁殖可以克服這些限制。雜交瘤細胞具有從親代淋巴細胞得來的腫瘤細胞的遺傳特性。如接種到組織相容性的同系小鼠或不能排斥雜交瘤的小鼠(無胸腺的裸鼠),雜交瘤細胞就開始無限地繁殖,直至宿主死亡。產(chǎn)生腫瘤細胞的小鼠腹水和血清中含有大量的雜交瘤細胞分泌的單克隆抗體,這種抗體的效價往往高于培養(yǎng)細胞上清液的100~1 000倍。
利用免疫抑制劑,如降植烷、液體石蠟、抗淋巴細胞血清等,可以加速和促進腫瘤的生長。
1.材料
(1)經(jīng)高壓滅菌的降植烷。
(2)Balb/c鼠:5~8周齡。
(3)雜交瘤細胞:取對數(shù)生長期的細胞。
(4)RPMI—1640培養(yǎng)液
(5)新生牛血清
2.操作方法
(1) 于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷,注射后1~9周內(nèi)種植細胞。
(2) 收取對數(shù)生長期的雜交瘤細胞,用5%FCS—1640液洗滌一次,1 000r/min離心10min。
(3) 取樣,用臺盼蘭染色,計活細胞數(shù),重新用5%FCS—1640液配成1.0×107細胞/ml的懸液。
(4) 給注射了降植烷的小白鼠接種雜交瘤細胞,每只腹腔注射1ml(含1.0×107個細胞/ml)。
(5) 接種后10天左右時間腫瘤體積zui大,此時可由腹腔抽取腹水,每隔1~3天取1次,可取10次。血清可由腋下動脈或心臟采血后分離。
(二)單克隆抗體的提純
1.材料
(1) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
20 mMol/L NaCl
(2) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
40mMol/L NaCl
(3) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
80 mMol/L NaCl
(4) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl緩沖液
(5) 飽和硫酸銨液
(6) DEAE—纖維素柱
2.操作方法
(1)小鼠腹水用冷PBS液稀釋4倍后,于1.00×105轉(zhuǎn)離心30min,去沉淀。
(2)在4℃于上清中緩緩滴加飽和硫酸銨液,邊加邊攪拌,使溶液zui終為50%硫酸銨濃度。
(3)此溶液置冰中30min~60min,然后5 000r/min離心10min,去上清。
(4)將沉淀溶于Tris-HCl緩沖液(40mMol/L NaCl)中(溶液可能混濁)。
(5)裝入透析袋于Tris-HCl緩沖液(20 mMol/L NaCl)中透析除鹽。
(6)離心去沉淀。
(7)溶液稀釋(1:100或更高倍稀釋)后,于280nm測蛋白含量,估計蛋白質(zhì)含量
1A 280unit=0.8mg蛋白質(zhì)
一般每ml腹水中,含有總蛋白約25mg~36mg。
(8)過DEAE—纖維素柱:纖維素柱高40cm,以20mMol/L NaCl Tris緩沖液平衡。透析樣品以Tris緩沖液等量稀釋。
樣品進入柱床速度為1ml~2ml/min,以NaCl線形梯度洗脫。大部分單克隆IgG于40 mMol/L和80mMol/L NaCl洗脫,也有極少例外的單克隆抗體于120 mMol/L ~150 mMol/L NaCl洗脫。
測OD280nm收集蛋白峰,單克隆IgG保存?zhèn)溆谩?/span>
雜交瘤產(chǎn)生各種免疫球蛋白,但主要是IgG和IgM,究竟是哪種為主,則決定于抗原的免疫程序。免疫一次,且3天后就取脾,多為產(chǎn)生IgM的B淋巴細胞。免疫多次的多為IgG。
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