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人降鈣素原（PCT） 酶聯免疫分析試劑盒
- 公司名稱：
- 更新時間：
- 所 在 地：
- 生產地址：
- 瀏覽次數：
- 廣州健侖生物科技有限公司
- 2015-12-11 16:37:25
- 廣州市
- 中國
- 915
【簡單介紹】
【詳細說明】
【產品名稱】
通用名稱：人降鈣素原（PCT）酶聯免疫分析試劑盒
英文名稱：PCT Quantitative Enzyme-linked Immunosorbent Assay Kit
【包裝規格】 96人份/盒
【預期用途】
本試劑盒采用ELISA雙抗體酶聯免疫夾心法定量檢測人血清、血漿及相關液體樣本中降鈣素原（PCT）含量。適用于嚴重感染或膿毒血癥的早期診斷；全身性感染與非細菌性炎癥反應（如自身免疫性疾病）的鑒別診斷；全身性細菌性感染與病毒感染的鑒別診斷；全身性細菌/真菌感染與器官移植排斥和移植后病毒感染的鑒別診斷；作為高危患者（如ICU、器官移植術后或接受免疫抑制治療的患者）感染性疾病的監測指標。
【臨床意義】
人降鈣素原（PCT）是人降鈣素的前體物，無激素活性，其在健康人血清中水平極低，但在全身性細菌感染患者血清中含量迅速升高，感染后兩個小時即可檢測到，且持續時間長，其在血清中的水平與感染性疾病的嚴重程度呈正相關,經有效抗生素治療后，PCT水平可迅速下降，而病毒感染、腫瘤、自身免疫性疾病、外傷（多創傷或手術創傷）、臨床用藥、慢性炎癥以及局部感染者，PCT水平維持在正常范圍內或者有輕度升高。因此，PCT是細菌感染所致重癥全身性炎癥反應的良好指標，在全身性細菌感染和膿毒癥輔助鑒別診斷、預后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價值。
人降鈣素原（PCT）是人降鈣素的前體物，無激素活性，其在健康人血清中水平極低，但在全身性細菌感染患者血清中含量迅速升高，感染后兩個小時即可檢測到，且持續時間長，其在血清中的水平與感染性疾病的嚴重程度呈正相關,經有效抗生素治療后，PCT水平可迅速下降，而病毒感染、腫瘤、自身免疫性疾病、外傷（多創傷或手術創傷）、臨床用藥、慢性炎癥以及局部感染者，PCT水平維持在正常范圍內或者有輕度升高。因此，PCT是細菌感染所致重癥全身性炎癥反應的良好指標，在全身性細菌感染和膿毒癥輔助鑒別診斷、預后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價值。
在局限性感染、病毒感染、自身免疫性疾病、手術創傷和慢性炎癥時，其血漿濃度正常或輕度升高；嚴重細菌感染或霉菌、寄生蟲感染（如腹膜炎、軟組織感染、蜂窩組織炎、吻合口漏、肺炎、ARDS）時大量上升，特別是膿毒性休克時PCT時濃度成倍升高。因此，利用它能有效地評估感染和炎癥的嚴重程度及進展情況，還能監測藥物療效，指導外科圍手術期的處理以及抗生素正確應用。
作為高危患者（如ICU、器官移植術后或接受免疫抑制治療的患者）感染性疾病的監測指標；早期預測膿毒性休克、多器官功能不全綜合征（MODS）、成人呼吸窘迫綜合征（ARDS）及多器官功能障礙（MOF）的發生及判斷疾病預后等。
【檢測原理】
本試劑盒采用雙抗體夾心法測定標本中人降鈣素原（PCT）水平。用純化的人降鈣素原（PCT）抗體包被反應板，加入待測標本孵育后，再加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的PCT抗體。如果標本中含有PCT，則能與包被在反應板上的PCT抗體結合，并與HRP標記的PCT抗體形成復合物，經洗滌后加入TMB底物，TMB在HRP酶的催化下產生藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。酶標儀在450nm波長下測定的吸光度（OD值）與標本中PCT含量呈線性關系。通過繪制標準曲線可以計算出標本中PCT的含量。
【主要組成成份】
| 序號 | 項目 | 容量 | 數量 |
| 1 | 濃縮洗滌液（30×） | 20 mL | 1瓶 |
| 2 | 酶標試劑 | 6mL | 1瓶 |
| 3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 1塊 |
| 4 | 樣品稀釋液 | 6mL | 1瓶 |
| 5 | 顯色劑A液 | 6mL | 1瓶 |
| 6 | 顯色劑B液 | 6mL | 1瓶 |
| 7 | 終止液 | 6mL | 1瓶 |
| 8 | 標準品（2400 ng/L） | 0.5 mL | 1瓶 |
| 9 | 標準品稀釋液 | 1.5 mL | 1瓶 |
注：使用時，先將瓶中內容物搖勻，不同批號試劑盒組份請勿混用
【儲存條件及有效期】
1、 儲存條件：2～8℃避光保存。
2、 有效期：2～8℃避光保存，自半成品檢定合格之日起，有效期6個月。
【適用儀器】
酶聯檢測系統：
| ① | 洗板機（非必須） | 一臺 |
| ② | 酶標儀 | 一臺 |
| ③ | 恒溫箱 | 一臺 |
【樣本要求】
1、 本試劑盒適用于定量檢測人血清、血漿及相關液體樣本中降鈣素原（PCT）含量。
2、 血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3、 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于1000 g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
4、 其它生物標本：1000 g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
5、 樣本使用前應置于室溫（18～30℃）平衡30分鐘。
6、 樣本稀釋時應充分混勻，盡量避免起泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩。
7、 樣本采集和處理時應戴口罩和手套，避免汗液、唾液及其氣溶膠污染樣本。
8、 樣本檢測前如需運輸，建議運輸時保持2-8℃（冰盒）或-20℃（干冰），不要超過上述保存期限。
9、 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性
【檢驗方法】
1、試劑、樣本準備
⑴ 試劑準備
① 將試劑盒置室溫（18～26℃）平衡15～30分鐘。
② 從試劑盒中取出濃縮洗滌液，用新鮮的純化水1：1稀釋后加入洗板機的洗液瓶中。
⑵ 樣本準備
標準品的稀釋：用標準品稀釋液按照下圖表將標準品稀釋，制備1-5號標準樣品。為保證結果的準確性，每次實驗請配置新的標準品溶液。
| 1200 ng/L | 5號標準品 | 150 μL的原倍標準品加入150 μL標準品稀釋液 |
| 600 ng/L | 4號標準品 | 150 μL的5號標準品加入150 μL標準品稀釋液 |
| 300 ng/L | 3號標準品 | 150 μL的4號標準品加入150 μL標準品稀釋液 |
| 150 ng/L | 2號標準品 | 150 μL的3號標準品加入150 μL標準品稀釋液 |
| 75 ng/L | 1號標準品 | 150 μL的2號標準品加入150 μL標準品稀釋液 |
2、試驗條件
在室溫（18～26℃）嚴格按照試劑盒說明書進行操作。
3、操作步驟
（1） 取出所需的PCT抗體包被板反應條置于微孔架上（立即將剩余的微孔反應條放回鋁箔袋中，并重新密封鋁箔袋）。
（2） 分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50 μL，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測樣品10 μL（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，置37℃恒溫箱孵育30分鐘。
（3） 小心揭掉封板膜，棄去孔內液體，洗滌液注滿各孔、靜置30秒，甩干，重復5次，拍干。或者利用洗板機洗滌：程序4個循環，每孔350 μL，洗滌后拍干。
（4） 加入酶結合物，每孔加入酶標試劑50 μL，空白孔除外，充分混勻，置37℃恒溫箱孵育30分鐘。
（5） 重復操作程序③
（6） 加入顯色劑A50 μL，再加入顯色劑B50 μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
（7） 每孔加終止液每孔50 μL，充分混勻，終止反應。
（8） 以空白孔調0，用酶標儀依序測量各孔在450 nm波長的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
4、試驗結果的計算
可以采用作圖法或計算法進行結果計算，推薦采用計算法。
作圖法：以標準品抗原含量為橫坐標（x），以其對應的吸光值（OD值）為縱坐標（y）繪出標準曲線，然后根據檢測樣本測得的吸光度（OD值）在標準曲線上查出相應的樣本抗原含量，再乘以樣本稀釋倍數，即為樣本的實際濃度。
計算法：以標準品抗原含量為自變量（x），以其對應的吸光值（OD值）為應變量（y），求出回歸方程，將待測樣本的吸光值代入回歸方程，求得對應的標本抗原含量，再乘以樣本稀釋倍數，即為樣本的實際濃度。
【檢測范圍】
75ng/L -1200ng/L
【參考值（參考范圍）】
健康人：<500 ng/L
【檢驗結果的解釋】
對PCT陽性檢出者，應結合病史、臨床癥狀及體征等綜合判斷。以PCT含量<500 ng/L的為陰性，對PCT含量在100~500 ng/L之間者，建議動態觀察。對PCT含量大于1200 ng/L的樣本，應準確稀釋后重做，zui后將測得的PCT含量乘稀釋倍數即為該樣本實際PCT含量。
【檢驗方法的局限性】
PCT的水平作為診斷、監測重癥感染患者的常規指標，不能作為是否存在細菌和病毒感染的*依據。對PCT檢測結果的解釋需結合其他臨床檢查結果和根據臨床疾病診斷的程序。
需要注意的是：
（1） 在病毒感染或非感染性炎癥反應時，血PCT水平不升高或僅有輕度升高。
（2） PCT水平測定不能特異性反映病原體類型及其對抗生素的敏感性和耐藥性；必須同時結合病原學檢查和藥物敏感試驗結果以提高治療的針對性。
（3） 接受OKT3免疫抑制治療的移植患者PCT水平常有提高，這可能是細胞因子釋放綜合征的繼發表現，應用OKT3后PCT水平的升高并不一定提示感染的存在，須結合其他指標綜合分析。
（4） 膿毒血癥患者不論是否接受免疫抑制治療，其在發生膿毒癥的zui初3天內PCT水平并無差異，隨后免疫缺陷患者在第3～5天時PCT 值有所減低，而免疫力正常的患者至第5天后PCT水平才開始下降,對于膿毒血癥患者建議采取動態觀察。
【產品性能指標】
1. 特異性：
20份正常人血清PCT 檢測結果不得出現一份大于500 ng/L。
2. zui低檢出量：zui低檢出量為40 ng/L。
3. 線性范圍：75ng/L～1200ng/L，相關系數r應不低于0.98。
4. 穩定性：37℃放置3天，檢定結果應達到標準。
【注意事項】
1． 試劑盒使用前應置于室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 使用時，先將瓶中內容物搖勻，不同批號試劑盒組份請勿混用。
3． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
4． 嚴格控制反應時間和顯色時間，一次加樣時間控制在5分鐘內。
5． 本試劑盒為一次性用品，使用后的試劑盒和樣本等廢棄物應作為傳染源按照國家相關規定處理。
6． 底物請避光保存。
7． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
8． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，無效結果必須重測。
9． 本試劑盒采用硫酸作為終止液，其具有輕微的腐蝕性，使用時應避免接觸衣物或眼、手等皮膚暴露部位。
【生產企業】 廣州健侖生物科技有限公司
【】
【】
【電子郵件】 Service@jianlun.com
【騰訊 】 712628581 712628582
【公司】 www.jianlun.com
【營銷中心】 廣州市中山大道中358號東溪商務大廈B座511室
【公司地址】 廣州市天河區車陂第十五工業園一幢4067室
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