9L 小鼠膠質(zhì)瘤細胞株
培養(yǎng)條件: | *培養(yǎng)基:PMI1640+10%胎牛血清 培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% 9L 小鼠膠質(zhì)瘤細胞株 | |
傳代方法: | 收到細胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。 (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下: 1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來。 3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。 注意:傳代后一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應(yīng)而造 成生長不好。 | |
凍存方法: | 凍存液:95%*培養(yǎng)液,5%DMSO 儲存:液氮儲存 |
凍存液:95%*培養(yǎng)液,5%DMSO
儲存:液氮儲存