PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
PT-K75 豬鼻甲黏膜成纖維細胞
細胞株名稱:豬鼻甲黏膜成纖維細胞(PT-K75)
種屬:豬
組織來源:豬鼻
生長特性:成纖維細胞樣,貼壁生長
形態特征:上皮細胞
培養條件:
*培養基:DMEM培養基(GIBCO),90%;進口優質胎牛血清,10%,雙抗,1%。
培養條件:37℃ carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在顯微鏡下觀察細胞生長情況。 (一)如果細胞未超過80%匯合度時,用75%酒精噴灑整個瓶身消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶,吸出培養液,僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。
(二)如果細胞已超過80%匯合度時,可根據情況進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)潤洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置37℃培養箱中1-3分鐘預熱,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清,補加1-2ml培養液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5ml培養基的新皿中或者培養瓶中。 5. 2-3天換液一次。
注意:收到細胞后將細胞放入37度培養箱中預溫1-2小時后再做處理,以穩定細胞狀態。傳代后細胞應該用新鮮的培養液,原瓶的培養液不能再使用。在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養。(收到細胞后3天內發現細胞異常請及時拍照并聯系