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徠卡熒光顯微鏡的主要組成部分

時間:2013-8-22閱讀:1737
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 徠卡熒光顯微鏡的主要組成部分

 
徠卡熒光顯微鏡依據光路可分為透射式和落射式兩種,現今徠卡新型熒光顯微鏡多為落射式熒光顯微鏡,某些徠卡大型熒光顯微鏡中兼有透射利落射兩種方式的激發光路。①透射式熒光顯微鏡,激發光源是從標本下方經過聚光鏡穿過標本材料來激發熒光,適于觀察對光可適的標本。其優點是低倍鏡時熒光強,而缺點是隨放大倍數增加其熒光減弱。②落射式徠卡熒光顯微鏡,是近代發展起來的新式熒光顯微鏡,其激發光源是從標本上方經過套在物鏡外用的特殊的垂直照明器,從物鏡周圍落射到標本上,光路中需加上一個雙色束分離器,它與光軸呈45。角,激發光被反射到物鏡中,并聚集在樣品上,樣品所產生的熒光以及由差玻片表面等反射的激發光同時進入物鏡,即用同一物鏡作為聚光器和收集熒光的物鏡。由于不必透過載坡片,減少了激發光的無效吸收,提高了對激發光的利用率。如換用不同的激發濾片/雙色束分離器/阻斷濾片的組合插塊,可滿足不同熒光反應產物的需要。徠卡熒光顯微鏡的優點是視野照明均勻,成像清晰,放大倍數愈大,熒光愈強。這里我們主要介紹落射式熒光顯檄鏡的構造。
 
(一)光源
 
受檢標本所能發出的熒光強度通常取決于激發光源的強度。由于熒光物質的量子效規格,由啟動裝置校制,其使用壽命與啟動次數和工作時間密切相關o
 
(二)濾片系統
 
濾片的正確選擇是獲得良好熒光觀察效果的重要條件,包括激發濾片、阻斷濾片熱濾片和紫外線吸收濾片等。
 
1.激發濾片激發濾片裝在光源和標本之間的濾片滑板中,其作用是吸收光源中波良較長的可見光,使短于一定波江的光波通過,作為徠卡熒光顯微鏡的激發光。各類徠卡熒光顯微鏡使用的激發濾片型號、名稱均不相同,但大都根據其光譜的基本色調命名,如W(紫外光)、B(藍色)、Dv(藍紫色)等,使用時應根據觀察的熒光所需要的激發波長,選擇某一種濾片并推入光路。
 
2.阻斷濾片阻斷濾片又稱吸收濾X,是裝在物鏡和目鏡之間的光路滑板中,其作用是吸收視野內末被標本吸收的激發光,允許標本內物質發射的熒光通過,以獲得清晰的熒光圖像和保護觀察吝的眼睛。阻斷濾片多采用數字作為標志,吸收短于濾片標記數字的波長光,允許長于標記數字的波長光通過。在進行熒光染色觀察時,激發濾片和阻斷濾片必須聯合應用,要根據使用的熒光素有效吸收波長的不同,選用適當的濾片,即激發濾片允許某種波長范圍的激發光通過,則相應的使用能吸收和阻斷該波長范圍的阻斷濾片。
 
備注:徠卡熒光顯微鏡的主要組成組成部分由北京中儀光科科技發展有限公司編輯整理上傳。

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