該方法檢驗原理是:
微生物中分子量在2000-20000Da范圍內(nèi)的核糖體蛋白質(zhì),其表達基本不受培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、滅活方式以及生長周期等的影響,屬于保守表達的蛋白質(zhì),不同種的微生物(甚至亞種)其保守蛋白會有差異,因此每種微生物有其*的蛋白質(zhì)指紋圖譜(PMF);通過MALDI-TOF測得的微生物蛋白質(zhì)指紋圖譜,再與標準庫里的指紋圖譜進行匹配、對比,從而完成對微生物快速的鑒定。
除了微生物鑒定外,MALDI-TOF技術(shù)還可應(yīng)用于多種領(lǐng)域,范圍極廣:
1、可疑菌溯源性分析:在檢測出未知菌時,可自建菌庫,保留菌株圖譜信息,有助日后可疑菌的溯源分析。
2、腫瘤篩查中的運用:利用弱陽離子磁珠聯(lián)合MALDI-TOF-MS分析腫瘤患者和健康對照血清蛋白質(zhì)表達譜,鑒定差異表達蛋白,建立疾病診斷模型,探索該疾病的發(fā)病機制。
3、細菌耐藥性分析:MALDI-TOF MS檢測細菌耐藥性的方法主要分為 3 類: 檢測耐藥菌株的特征性質(zhì)譜峰、細菌酶活性作用下抗菌藥物的改變和抗菌藥物存在下細菌生長情況。
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