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技術文章

大鼠TNF-a免疫組化試劑盒操作時的問題由上海恒遠公司歐陽技術來為您解答

閱讀:1275          發布時間:2014-5-16

上海恒遠公司的吳講到:ELISA試劑盒實驗過程中我們會遇到各種各樣的問題,上海恒遠公司吳在這跟老師們說,實驗過程中遇到問題不要慌,不要緊張,我們首先要找到問題的出發點,是試劑盒的問題還是操作時漏了一個步驟沒做等,您不知道可以來電詢問我公司的技術人員,下面就讓我司的歐陽技術來為大家講解大鼠TNF-a免疫組化試劑盒在實驗過程中遇到的問題及解析。
本實驗采用雙抗體夾心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TNF-a 單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的 TNF-a與單抗結合,加入生物素化的抗大鼠TNF-a,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,zui后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,TNF-a濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中TNF-a濃度。
檢測程序
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul,將反應板充分混勻后置37℃120分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌4-6次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入*抗體工作液100ul。將反應板充分混勻后置37℃60分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul。將反應板置37℃30分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗處反應15分鐘。
8. 每孔加入100ul終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450nm處測吸光值。
大鼠TNF-a免疫組化試劑盒
注意事項
1. 以上標準孔及待測樣品均建議做復孔,每次測定應同時做標準曲線。
2. 洗滌過程很關鍵。洗滌不充分將導致度誤差及OD值錯誤地升高。
3. 板條開封后剩余板條要再封好,保持板條干燥。
4. 本試劑盒宜置4oC冰箱保存。
5. 本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
以上是我公司歐陽技術為各位老師講解的大鼠TNF-a免疫組化試劑盒在實驗過程的遇到的問題及解析,選擇上海恒遠是您zui忠實的合作伙伴!

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