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ELISA試劑盒中的抗體
閱讀:579 發(fā)布時間:2023-5-4在ELISA試劑盒中運用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。
多抗取白免疫動物的抗血清,制備較簡略,但抗血清成分凌亂,除含針對抗原(多個表位)的抗體外,還含有多種其他抗體,親和力和特異性相對要低于單抗,且制備周期長,批間差異較大。而單抗僅針對抗體的單一表位,ELISA試劑盒親和力和特異性均較多抗高,且制備技能老練,產量大,批間差異小,但結合位點的單一也正是其缺陷之地址,在雙抗體夾心法中,如包被和指示抗體運用同一單抗,則由于結合位點的短少,簡略構成假陰.性成果。在運用雙單抗一步法時,應留意抗原過剩時的“鉤狀效應"。
在ELISA試劑盒中運用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有3類,即天然抗原、人工組成抗原和基因重組抗原。天然抗原的純度不高,特異性不強;組成抗原一般為多肽片段,短少天然抗原所具有的立體結構表位,親和力不高,可能導致相應表位的抗體漏檢;基因重組抗原具有安全、特異性強、親和力高、產量大等特征,是一種比較志向,但其純化比較困難。