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南京賽泓瑞生物科技有限公司是專業從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發、銷售、服務為一體的專業性生物科技公司。本著服務科學的理念,賽泓瑞建立了生命科學研究工具的研發、生產、銷售及技術服務平臺,現已有數百余種產品,并每年不斷開發新產品,為廣大的生命科學研究人員、醫學、藥學、農業、環保等的科研人員提供科研工具性產品及技術服務 。
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由美國BIOTIUM公司技術專家研發的GelRed 和GelGreen 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩定于一身的的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國*安全認定,廢棄物可直接倒入下水道,而不會造成任何環境污染。
Biotium公司的GelRed 和 GelGreen 無論用于預制凝膠染色還是凝膠電泳后染色,都表現出了*的靈敏度。為配合 312 nm UV 凝膠成像系統而設計的 GelRed ,在使用了我們新開發的具有的試驗步驟后(該試驗步驟中使用稀釋的 NaCl 溶液替代傳統的 TBE 緩沖溶液),在凝膠電泳后染色中優于或者至少相當于 SYBR Gold 。但與 SYBR Gold 不同, GelRed 在預制凝膠中使用時仍然有*的靈敏度,事實上GelRed 在檢測低濃度、微量 DNA 方面比 EB 表現出更高的靈敏度,尤其對小分子量的 DNA 檢測非常靈敏(圖1)。 GelGreen 可以滿足使用 488 nm 激光凝膠掃描儀或者可見光激發的 Dark Reader 的研究人員的使用要求。 GelGreen 無論是在預制凝膠還是凝膠電泳后染色中都與 SYBR Green I 靈敏度相當,但不存在后者的不穩定性問題。實際上, GelRed 和 GelGreen ,特別是 GelRed 非常穩定,可以*在室溫下保存。當這兩種染料稀釋在 TBE 或者類似的電泳緩沖溶液中時甚至可以使用微波爐加熱,便于采用常規方法制備預制凝膠。含有染料的預制凝膠可以成批制備,*保存。
同樣重要的是, GelRed 和 GelGreen 相比 EB 或 SYBR Green I 提高了安全性。 獨立的測試服務公司( Litron Laboratories, Inc. )進行的標準艾姆斯氏測試結果表明, 在 18.5 μ g /mL (該濃度遠高于*用于電泳后染色的 約 4 μ g/mL 的 3X 染色液 )濃度下, GelGreen 沒有誘變性,而 GelRed 也僅在 S9 代謝活化時有微弱的誘變性。 GelRed 和 GelGreen 的特殊化學結構使其難以穿透細胞膜進入細胞,正是這一特性降低了染料的細胞毒性。如圖3。相反, SYBR Green I 廣泛地用于活細胞線粒體和核 DNA 染色,這正是由于它能快速的被細胞吞入。由于已知 SYBR Green I 對紫外線導致的突變有強烈的增強作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),因此它的高細胞膜透性使它在紫外環境觀察時成為凝膠染色的主要有害物質。
安全性測試 | ||||
SYBR Dyes | GelRed | GelGreen | ||
A) 5 min. incubation | 要想讓DNA染色劑安全,*的辦法就是設法不讓其穿透細胞膜進入活體細胞內,Biotium 做到了! | |||
B) 30 min incubation | ||||
圖 3. 在37°C下,分別使用1X SYBR Green I, SYBR Safe, GelRed and GelGreen 對HeLa 細胞進行孵化,并分別在5分鐘(A)和30分鐘(B)后觀察。實驗顯示SYBR染料迅速進入細胞并將細胞內的核酸染成亮綠色(以上僅圖示 SYBR Green 1),而 GelRed 和 GelGreen 則因為不能穿透細胞膜而*沒有進入細胞內, 足以證明GelRed和GelGreen是安全的。 | ||||
圖 4. GelGreen (綠色) GelRed (紅色)在 PBS 緩沖溶液中結合 dsDNA 后的激發和發射光譜。 | ||||
圖 5. 室溫下, GelRed TM ( 500 nm )和 SYBR Gold ( 488 nm )稀釋在 1 × TBE 凝膠染色液中測得的吸光度隨時間變化圖。 GelRed 和 SYBR Gold 初始的吸光度值分別為 0.029 和 0.051 。 |
Table A. 訂貨信息
Cat# | Product Name | Unit Size | Unit Price | 品 牌 | |
41001 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 3X in water | 4.0 L | ¥2411 | Biotium | |
41002 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | ¥1176 | Biotium | |
41003 | GelRedTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5 mL | ¥1235 | Biotium | |
41003-1 | GelRedTM 10,000X solution in water, bulk pack | 10 mL | ¥19757 | Biotium | |
41004 | GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in DMSO | 0.5 mL | ¥1058 | Biotium | |
41005 | GelGreenTM Nucleic Acid Gel Stain, 10,000X in water | 0.5mL | ¥1176 | Biotium |
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