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線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒
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- 上海研生實業(yè)有限公司
- 900 - 2820 （具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)）
- 2024-09-02 12:49:13
- 上海市
- 國產(chǎn)
- 972
【詳細(xì)說明】
商品詳情：
線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒測定意義：
CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個中間產(chǎn)物，由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成，其含量是三羧酸循環(huán)強度的主要指標(biāo)之一。
配合測定酸含量、酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量，其中(1)酸含量和酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度，(2)綜合分析酸含量、酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況，(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進行狀況。
貨號 | 規(guī)格 | 檢測方法 |
YSH3487 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3487-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
YSH3487-1 | 25管/24樣 | 紫外分光光度法 |
測定原理：
CA在檸檬酸裂解酶的作用下，生成α-酮酸(草酰乙酸)；在弱酸性條件下，α-酮酸進一步與苯肼反應(yīng)，生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙；α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰，該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽、蒸餾水。
樣品中AA提取：
1.按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后，8000g，，4℃離心10min，上清液置冰上待測。
2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
3.血清等液體：直接檢測。
計算公式如下：
1、血清（漿）LAP活力的計算:
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計算:
（1）按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對硝基苯胺定義為一個酶活力單位。
LAP（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L；ε：對硝基苯胺摩爾消光系數(shù)，9.72×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，2 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；2000：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，2000萬。
注意事項：
1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制，且避光保存，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。
2. 為保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，需先取1-2個樣做預(yù)實驗，如果測定的吸光值過高（高于2.5），用蒸餾水稀釋后再測定。
3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。
4．檢出限為100μmol/L。
核糖核酶A12ELISA試劑盒 RNASE12免費代測試劑
核糖核酶A11ELISA試劑盒 RNASE11免費代測試劑
核糖核酶A10ELISA試劑盒 RNASE10免費代測試劑
核糖核酶ⅢELISA試劑盒 RNASEN免費代測試劑
核外切酶1ELISA試劑盒 EXO1免費代測試劑
核受體相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒 NURR1免費代測試劑
核仁磷蛋白3ELISA試劑盒 NPM3免費代測試劑
核仁磷蛋白2ELISA試劑盒 NPM2免費代測試劑
核仁蛋白9ELISA試劑盒 NOL9免費代測試劑
核仁蛋白8ELISA試劑盒 NOL8免費代測試劑
核仁蛋白7ELISA試劑盒 NOL7免費代測試劑
核仁蛋白6ELISA試劑盒 NOL6免費代測試劑
核仁蛋白58ELISA試劑盒 NOP58免費代測試劑
核仁蛋白4ELISA試劑盒 NOL4免費代測試劑
核仁蛋白3ELISA試劑盒 NOL3免費代測試劑
線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒/分光光度法50管/48樣
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒/微量法100管/96樣
肉桂醇脫氫酶(CAD)測試盒/分光光度法50管/48樣
肉桂醇脫氫酶(CAD)測試盒/微量法100管/96樣
肉桂-4-羥化酶(C4H)測試盒/分光光度法50管/48樣
肉桂-4-羥化酶(C4H)測試盒/微量法100管/96樣
乳(LD)測試盒(測全血)/比色法50管/48樣
乳(LD)測試盒(測血清、組織)/比色法50管/48樣
乳含量(LA)測試盒/分光光度法50管/24樣