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乙酸激酶(ACK)測(cè)試盒
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- 上海研生實(shí)業(yè)有限公司
- 870 - 1680 （具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)）
- 2024-09-02 12:15:13
- 上海市
- 國(guó)產(chǎn)
- 1179
【詳細(xì)說(shuō)明】
商品詳情：
乙酸激酶(ACK)測(cè)試盒測(cè)定意義：
ACK主要存在于微生物中，催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP，是細(xì)菌碳代謝和能量代謝的關(guān)鍵酶，尤其是在古細(xì)菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。
測(cè)定原理：
(1)ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP，(2)酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和酸，(3)乳酸脫氫酶催化酸和NADH生成乳酸和NAD+，(4)在340nm下測(cè)定NADH氧化生成NAD+速率，即可反映ACK活性。
需自備的儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體×1瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1瓶（棕色），4℃避光保存。臨用前加入667μL無(wú)水乙醇，蓋緊后充分混勻，再加入9.333 mL蒸餾水混勻，避光保存。
試劑四：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水，充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1瓶，臨用前加10 mL蒸餾水，充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液，4℃避光保存。
商品屬性：
貨號(hào) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 |
YSH3509 | 100管/96樣 | 微量法 |
YSH3509-1 | 50管/48樣 | 紫外分光光度法 |
測(cè)定操作：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到570 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管：取EP管，加入10μL蒸餾水，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測(cè)定吸光值，記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP管，加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測(cè)定吸光值，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
4. 測(cè)定管：取EP管，加入10μL上清液，100μL試劑二，100μL試劑三和10μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次，于570nm測(cè)定吸光值，記為A測(cè)定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。
注意：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。
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