產品簡介
2 方法原理:將營養培養基、凝膠和氯化三苯基四氮唑(TTC)顯色劑等加載在試紙片,經加樣、培養后,細菌菌落在測試片上顯現出紅色菌斑,通過計數報告結果
詳細介紹
菌落總數測試片 24片/包
菌落總數測試片檢測方法
方法編號:5011
1 適用范圍:可用于各類食品及原料中菌落總數的測定。也可用于與食品接觸的容器、操作臺和其他設備表面的衛生檢測。
2 方法原理:將營養培養基、凝膠和氯化三苯基四氮唑(TTC)顯色劑等加載在試紙片,經加樣、培養后,細菌菌落在測試片上顯現出紅色菌斑,通過計數報告結果。
3 操作方法
3.1樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質杯內,經充分振搖(均質)做成1:10的稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內,用1mL滅菌吸管反復吸吹制成1:100的稀釋液。以此類推,做出1:1000等稀釋度的稀釋液,每個稀釋度更換一支滅菌吸管。
3.2接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測。將測試片放在水平臺面上,揭開上面的透明薄膜,用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL,均勻加到*的紙片上,輕輕將上蓋膜放下,靜置5 min使培養基凝固,zui后用手輕輕地壓一下。每個稀釋度接種兩片。
3.3培 養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
4 結果判斷與計數:
4.1細菌在紙片上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數適中(10個~100個)的紙片進行計數,乘以稀釋倍數后即為每克(或毫升)樣品中所含的細菌菌落總數。菌落數在100以內時,按實有數報告。大于100時,用二位有效數字,二位有效數字后面的數字,以四舍五入方法計算,并以10的指數來表示。
4.2計數原則與報告方式
4.2.1 通常選擇菌落在10個~100個之間的紙片進行計數,乘以稀釋倍數報告之(見下表中例次1)。國家標準菌落總數報告方式術語為cfu/g或mL,cfu的含義為菌落形成單位。
4.2.2 若有兩個稀釋度的菌落數在10個~100個之內,兩者的比值小于2,則取其平均數,若大于2,則采用稀釋度小者報告(見下表中例次2和例次3)。
4.2.3 若三個稀釋度的菌落數都有在10個~100個之內時,應選擇二個低數值的平均數(見下表中例次4)。
4.2.4 若三個稀釋度的菌落數均小于10個或大于100個時,應重新試用更低或更高的稀釋度進行菌落計數;或采用均小于數量標準的zui小值,或采用均大于數量標準的zui大值(見下表中例次5和例次6)。
例次
稀釋度
兩稀釋
度之比
選定計數
稀釋度
報告方式
(個/g或
個/mL)
10-1
10-2
10-3
1
2
3
4
5
6
158
208
265
98
8
295
76
68
82
50
5
174
5
12
50
15
1
106
—
1.8
6.1
—
—
—
10-2
10-2、10-3
10-2
10-1、10-2
10-1
10-3
7.6×103
9.4×103
8.2×103
3.0×103
8.0×10
1.1×105
5 表面取樣方法:加1mL滅菌生理鹽水在測試片上,靜置至少1h使培養基凝固;提起上層膜,使*濾紙部分貼到待測物表面,用手在外側輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養箱內培養。
6 注意事項:使用過的紙片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理