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人胱天蛋白酶5(Caspase-5)ELISA試劑盒供應信息由上海研域生物提供 , 包括人胱天蛋白酶5試劑盒產品的規格 , 價格 , 保質期 , 用途 , 產品說明書等本試劑盒的詳細介紹。
操作流程:
1、實驗標準品、試劑及樣本的準備
2、加樣(標準品及樣本)100μL,37℃孵育2小時
3、吸棄,加檢測溶液A100μL,37℃孵育1小時
4、洗板3次
5、加檢測溶液B100μL,37℃孵育1小時
6、洗板5次
7、加TMB底物90μL,37℃孵育15-25分鐘
8、加終止液50μL,立即450nm讀數
操作步驟:
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(此時藍色立轉)。
11. 測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內進行。
人胱天蛋白酶5(Caspase-5)ELISA試劑盒供應信息
注意事項:
1. 操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
2. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 1530 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
3. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5. 底物請避光保存。
6. 試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為 630nm
7. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為 2M 的硫酸,使用時必須注意安全。
人胱天蛋白酶5試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中胱天蛋白酶5(Caspase-5)含量。
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