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590次大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書
試劑盒組成
1包被微孔板:一塊。
2酶標記物:1
瓶[6.0mL],有效期內使用。
3底物Ⅰ:1
瓶[6.0mL],有效期內使用。
4底物Ⅱ:1
瓶[6.0mL],有效期內使用。
5濃縮清洗液[1:10
蒸餾水或純凈水稀釋]:1
瓶[50mL],有效期內使用。
6終止液:1
瓶[6.0mL],有效期內使用。
7標準品:5
瓶[1.0mL/瓶],有效期內使用。
8 檢測范圍及各標準品濃度:0,50,100,250,500pg/mL。
大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書需要但未提供的試劑和器材
◆水溫箱或恒溫箱
◆標準規格酶標儀
◆自動洗板機
◆樣本稀釋液
◆可調節移液器及配套吸頭
◆蒸餾水和容量瓶
◆無菌試管
◆ 震蕩器及磁力攪拌器
◆ 封板膜
注意事項
1在試驗之前要將試劑盒在室溫下平衡至少30分鐘。
2使用之前一定要首先確認試劑盒內所有試劑均為正常狀態再進行后面的操作。
3如有問題或不懂之處請務必與供貨商進行溝通,否則造成的任何損失均與本司
無關。
4 不要重復使用手中的吸頭和試管以及混淆各組分瓶蓋,否則會引起交叉污染,
導致試驗失敗。
5該試劑盒內不包含有傳染性試劑。
6不要混用不同指標不同批號的試劑和包被微孔板。
7試驗過程中試劑和待測樣品均應充分混勻。
8包被微孔板應放置2-8℃干燥保存,避免受潮。
9如有剩余試劑請放置2-8℃冷藏保存。
10試驗過程要嚴格按照說明書操作,先后順序不得顛倒。
11如果樣品量較大應注意加樣時間,避免加樣過慢或間隔時間過長。
12使用和貯存底物Ⅱ時應注意避光。
13終止液含有酸性成分具有腐蝕性,勿將其濺落到皮膚或衣服上。如有該情況發生應立即使用冷水沖洗。
14試驗期間室內溫度應始終保持在20-25℃。并保持室內清潔,無粉塵。
15避免直接接觸試劑盒內的液體,一旦接觸請盡快用水清洗。
16在試驗過程中不要吸煙、使用化妝品和吃喝。這將對操作者的健康及試驗結果造成影響。
17不要用嘴吸取試劑瓶內的試劑。
大鼠白介素-1ELISA試劑盒說明書樣品的采集和制備
1 收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。
對收集后當天進行檢測的標本儲存在2-8℃備用,如有特殊原因需要周期檢測,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,并避免反復凍融。樣本2-8℃可保存48小時,-20℃條件下可保存1個月,-70
℃條件下可保存6個月。
2每個樣品量收集體積[100ul×需檢測的指標,注:樣品體積為處理后可進行zui終實驗的樣品體積]。
3 [血清]操作過程中避免受到刺激,使用非焦化和不含有內毒素的試管,靜脈穿刺收集血
液并迅速離心,
分離出血清[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應再次離心,具體離心的時間和轉速應根據樣品來決定。zui終實驗的樣品應為干凈透明狀的。
4 [血漿]可使用
EDTA[2.0%EDTA.Na2]來抗凝血漿并用于檢測,混合10-20分鐘后,離心祛除顆粒[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應再次離心,具體離心的時間和轉速應根據樣品來決定。zui終實驗的樣品應為干凈透明狀的。
5 [組織勻漿/細胞培養液(分泌性成分)]使用無菌管收集。離心后取上清液[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應再次離心,具體離心的時間和轉速應根據樣品來決定。zui終實驗的樣品應為干凈透明狀的。 組織勻漿:切割標本,稱取質量。加入PBS[7.0-7.4]充分混合,具體的混合比例由操作者自行決定或可參考相關文獻,如有問題也可與供貨商咨詢溝通后再進行后續操作?;旌虾蟮木彌_液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶),充分混合。 細胞培養液(胞內成分):應先用
PBS[7.0-7.4]稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到 100萬/mL左右,使用細胞裂解液或通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。如有沉淀形成,應再次離心。
6 [體液]離心后祛除顆粒和聚合物[2000-3000×g離心20分鐘]。如有沉淀形成,應再次離心。具體離心的時間和轉速應根據樣品來決定。zui終實驗的樣品應為干凈透明狀的。
7 不要使用高脂血癥、溶血、污染或滅活的樣品,這樣有可能會導致出現錯誤的結果。
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