支原體檢查培養基基本知識：
支原體(Mycoplasma)是細胞培養過程中常見的外源性污染物，開展支原體污染檢測是細胞質量控制微生物學安全性評價體系中的一項重要內容。由于活細胞制劑終產品不能滅菌處理，被支原體污染后不像細菌或者真菌那樣容易被肉眼看見，所以在其培養時也很難被觀察。因此需要適宜的支原體檢測方法。目前，《中華人民共和國藥典》規定的支原體檢測方法培養法和指示細胞培養法 (DNA染色法)是檢測支原體的“金標準"，能夠檢測不同生長特性的支原體，具有廣譜性 。

環凱的精氨酸支原體肉湯培養基（貨號：MP01B/MP01BP）和精氨酸支原體半流體培養基（貨號：MP01S/MP01SP）可用于檢驗利用精氨酸的支原體，如口腔支原體等，支原體肉湯培養基（貨號：MP02B/MP02BP）和支原體半流體培養基（貨號：MP02S/MP02SP）可用于檢驗利用葡萄糖的支原體，如肺炎支原體等。

支原體檢測培養基原理：

精氨酸支原體肉湯培養基：利用口腔支原體分解利用精氨酸產堿使得原本含酚紅的橙色培養基變為紅色。精氨酸支原體半流體培養基：直接培養口腔支原體于營養物質充足的培養基中，觀察其生長及菌落生成。支原體肉湯培養基：肺炎支原體通過葡萄糖代謝路徑利用葡萄糖產酸致使原本含酚紅的橙色培養基變為淡黃色。支原體半流體培養基：直接培養肺炎支原體接種于營養物質充足的培養基中，觀察其生長及菌落生成。

方法來源：

《中國藥典》2020年版 3301 支原體檢查法

靈敏度檢查（變色單位試驗法）

器具：

※ 半流體培養基在使用前應煮沸5~10 min，冷卻至55℃左右，然后加入新生牛血清或馬血清，充分搖勻。

→接種及培養：選取變色的新鮮培養物，接種至待檢培養基中，做10倍系列稀釋，肺炎支原體稀釋至 10??~10??，接種在支原體肉湯/半流體培養基內；口腔支原體稀釋至 10?3~10??，接種在精氨酸支原體肉湯/半流體培養基內。每個稀釋度接種3 支試管，置36±1℃密閉培養7?14天，觀察培養基變色結果。

→結果判定：以接種后培養基管數的 2/3 以上呈現變色的最高稀釋度為該培養基的靈敏度。

→陽性案例展示 

   圖A：精氨酸支原體肉湯培養結果，左邊紅色為陽性右邊橙色為陰性；

   圖D：支原體半流體培養結果，左邊有菌落懸浮為陽性，右邊試管為陰性。

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