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小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa

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更新時(shí)間:2017-09-16 17:43:12瀏覽次數(shù):730次

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小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa

Mouse glucocorticoid receptor,GR ELISAKit

 

 ELISA原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn):在應(yīng)用ELISA時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:

1,是檢測抗體還是抗原?

2,檢測的結(jié)果是定性還是定量?

3,是否需要檢測特異抗體的類型?

4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?
(1)檢測抗原? zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法。但競爭法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競爭法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。
(2)檢測抗體? 檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測特異性IgG、IgA和IgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測的一個(gè)種類的抗體,接下來是檢測捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA在檢測IgG時(shí)比較簡單,但不適用于檢測其他種類的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。
樣品采集:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。
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