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谷氨酰胺合成酶（GS）測試盒 氮代謝
貨號：BC0910
規格：50管/24樣
測定意義：GS（EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物體內氨同化的關鍵酶之一，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不僅可以防止過多的銨離子對生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要儲存和運輸形式。
測定原理：GS 在ATP 和Mg2+存在下，催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺進一步轉化為γ─谷氨酰基異羥肟酸，在酸性條件下與鐵形成紅色的絡合物；該絡合物在540nm 處有大吸收峰，可用分光光度計測定。
所需的儀器和用品：可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本測定的準備
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10 4 個）：
提取液體積（mL）為500~1000：1 的比例（建議500 萬細菌或細胞加入1mL 提取液），超聲波破
碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30 次）；8000g 4℃離心10min，
取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入
1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
二、測定步驟
1、 分光光度計預熱30min 以上，調節波長540nm，蒸餾水調零。
GS 活力單位的計算
1. 血清（漿）GS 活性
單位定義：每mL 血清（漿）在每mL 反應體系中每min 使540 下吸光值變化0.01 定義為一個
酶活力單位。
計算公式：GS（U/mL）=ΔA×V 反總÷V 樣÷0.01÷T =19×ΔA
2. 組織、細菌或細胞GS 活性
（1） 按樣本蛋白濃度計算：
單位的定義：每mg 組織蛋白在每mL 反應體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一
個酶活力單位。
GS（U/mg prot）＝ΔA×V 反總÷（Cpr×V 樣）÷0.01÷T =19×ΔA÷Cpr
（2） 按樣本鮮重計算：
單位的定義：每g 組織在每mL 反應體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為一個酶
活力單位。
GS（U/g 鮮重）＝ΔA×V 反總÷(W× V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =19×ΔA÷W
（3） 按細菌或細胞密度計算
單位定義：每1 萬個細菌或細胞在每mL 反應體系中每min 使540nm 下吸光值變化0.01 定義為
一個酶活力單位。
GS（U/10 4 cell）＝ΔA×V 反總÷(500×V 樣÷V 樣總)÷0.01÷T =0.038×ΔA
V 反總：反應體系總體積，0.8mL； V 樣：加入樣本體積，0.14mL；V 樣總：加入提取液體
積，1 mL；T：反應時間，30 min；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；500：細菌
或細胞總數，500 萬。
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運輸說明：
極低溫產品：極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
低溫產品：低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產品的性質穩定如一，為您的實驗保駕護航。
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