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乙醛脫氫酶(ALDH)試劑盒 輔酶系列
商品貨號: | 商品品牌: | 規格 | 基本售價: | 選擇規格 |
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BC0750-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣 | 760.00元 |
測定意義
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內,線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉化,所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關注;同時,乙醛脫氫酶在分子生物學以及相關疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。
測定原理
在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉化為乙酸和NADH,在340nm處的吸光值會增加,測定340nm處的吸光值變化,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實驗用品及儀器
天平、離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、蒸餾水。
乙醛脫氫酶(ALDH)試劑盒 輔酶系列
產品規格:50管/48樣 產品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:760
庫存狀態:現貨
關鍵字:乙醛脫氫酶試劑盒|活性檢測試劑盒| ALDH活性檢測|試劑盒
簡要介紹:
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內。主要作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內,線粒體乙醛脫氫酶能把對生物體有害的醇類轉化,所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關注;同時,乙醛脫氫酶在分子生物學以及相關疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉化為乙酸和NADH,在340nm 處的吸光值會增加,測定340nm 處的吸光值變化,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
產品詳細描述
商品貨號: | 商品品牌: | 規格 | 基本售價: | 選擇規格 |
BC0750-50管/48樣 | Solarbio | 50管/48樣 | 760.00元 |
產品內容:
提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體15mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體5mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體3mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑四:液體2mL×1 支,4℃保存。
試劑五:液體2mL×1 支,4℃保存。
產品說明:
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種,廣泛存在于各種動物、植物和微生物體內。主要 作用是將乙醛氧化成乙酸,在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動物體內,線粒體乙醛脫氫酶 能把對生物體有害的醇類轉化,所以在細胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關注;同時,乙醛脫氫 酶在分子生物學以及相關疾病的檢測方面有較廣泛的研究應用。 在輔酶Ⅰ存在的條件下,乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉化為乙酸和NADH,在340nm 處的吸 光值會增加,測定340nm 處的吸光值變化,可計算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實驗用品及儀器: 天平、離心機、恒溫水浴鍋、紫外分光光度、1mL 石英比色皿、蒸餾水。
操作步驟:
ALDH 提取:
按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5-10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。12000rpm, 4℃離心 20 分鐘。
按照細胞數量(10 4個):提取液體積(mL)為 500-1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細菌或細胞(功率 30%或 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒。總時間 3min);10000rpm, 4℃離心 10 分鐘,取上清,置冰上待測。
測定操作
對照管 | 測定管 | |
樣本(mL) | 0.2 | |
試劑一(mL) | 0.3 | 0.3 |
試劑二(mL) | 0.1 | 0.1 |
試劑三(mL) | 0.05 | 0.05 |
試劑四(mL) | 0.03 | 0.03 |
試劑五(mL) | 0.02 | 0.02 |
H2O(mL) | 0.5 | 0.3 |
充分混勻,1mL 石英比色皿,對照管調零,于340nm 處測定吸光值A1,迅速置于37℃水浴1min, 于340nm 處測定吸光值A2,△A= A1-A2。
ALDH 酶活計算
酶活定義:每毫克蛋白每分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活(U/mg prot)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T=0.804×△A÷Cpr
酶活定義:每克蛋白每分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活(U/g)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣×W÷V樣總)÷T=0.804×△A÷W
酶活定義:每10 4個細胞每分鐘催化還原1μmol NAD+的酶量為 1U。
ALDH 酶活(U/10 4 cell)=△A/(e× d) ×V反總÷(V樣÷V樣總×細胞數量(萬個))÷T=0.804×△A÷ 細胞數量(萬個) e :NADH 微摩爾消光系數,6.22×10-3 L/μmol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 反總:反應體系總 體積,1mL;V 樣:反應體系中樣本體積,0.2mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量, g;T:反應時間:1min。
相關文獻:
《Untangling the response of bone tumor cells and bone forming cells to matrix stiffness and adhesion ligand density by means of hydrogels》 作者:Tongmeng Jiang,Jinmin Zhao,Shan Yud,Zhengwei Mao,Changyou Gao,Ye Zhu,Chuanbin Mao,Li Zheng 期刊:Biomaterials 影響因子:10.273 PMID:30343256
《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin 期刊:Biotechnology for Biofuels 影響因子:5.452 PMID: